[发明专利]一种DENND1A-SGTA融合基因及其应用和检测试剂盒在审
申请号: | 202110589921.6 | 申请日: | 2021-05-28 |
公开(公告)号: | CN113308483A | 公开(公告)日: | 2021-08-27 |
发明(设计)人: | 闫金松;卢莹;纵鑫;王海娜;康志杰;杨岩;张成涛 | 申请(专利权)人: | 大连医科大学附属第二医院;上海交通大学医学院附属新华医院 |
主分类号: | C12N15/62 | 分类号: | C12N15/62;C12Q1/6886;C12Q1/6851 |
代理公司: | 上海盈盛知识产权代理事务所(普通合伙) 31294 | 代理人: | 孙佳胤 |
地址: | 116027 辽宁*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 dennd1a sgta 融合 基因 及其 应用 检测 试剂盒 | ||
1.一种DENND1A-SGTA融合基因,其特征在于,所述融合基因序列如SEQ ID NO.1所示。
2.权利要求1所述DENND1A-SGTA融合基因在制备急性淋巴细胞白血病诊断或监测试剂盒中的应用。
3.一种检测权利要求1所述DENND1A-SGTA融合基因的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括上游引物、下游引物、Taqman探针、内参、PCR反应缓冲液、阳性对照和阴性对照;
所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;
所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示;
所述Taqman探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
4.根据权利要求3所述的检测DENND1A-SGTA融合基因的试剂盒,其特征在于,所述Taqman探针的5’端标记有FAM基团,所述探针的3’端标记有TAMRA基团。
5.根据权利要求3所述的检测DENND1A-SGTA融合基因的试剂盒,其特征在于,所述内参中包含内参上游引物,内参下游引物和内参探针;
所述内参上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示;
所述内参下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示;
所述内参探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示。
6.一种非疾病诊断目的的检测权利要求1所述DENND1A-SGTA融合基因的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)提取人血液样本中的总RNA,将RNA反转为cDNA作为待测样品;
(2)配置PCR反应液,再分别加入待测样品,阳性对照和阴性对照;
(3)实时荧光PCR仪上检测,反应条件:95℃预变性10min;95℃15s,60℃1min,反应40个循环,荧光信号于60℃时采集;
其中所述PCR反应液包括上游引物、下游引物、Taqman探针、内参、PCR反应缓冲液、阳性对照和阴性对照,所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;
所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示;
所述Taqman探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
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