[发明专利]用于检测突变SARS-CoV-2病毒的组合产品、试剂盒、用途及方法

权利要求书

1.引物探针组合产品，包括a和/或b：

a)核苷酸序列为SEQ ID NO：1～6所示的引物以及SEQ ID NO：7～9所示的探针；

b)核苷酸序列为SEQ ID NO：10～15所示的引物以及SEQ ID NO：16～18所示的探针。

2.根据权利要求1所述的引物探针组合产品，其还包括用于检测SARS-CoV-2基因保守区段的质控引物和/或质控探针。

3.根据权利要求2所述的引物探针组合产品，所述保守区段来自SARS-CoV-2N基因。

4.根据权利要求2所述的引物探针组合产品，所述质控引物的核苷酸序列为SEQ IDNO：19～20所示，所述质控探针的核苷酸序列为SEQ ID NO：21所示。

5.根据权利要求1～4任一项所述的引物探针组合产品，所述探针标记有信号物质，例如荧光物质。

6.根据权利要求5所述的引物探针组合产品，每条探针上的所述荧光物质独立地选自AMCA、Atto 425、Atto 590、FAM、HEX、TET、NED、ROX、CY5、CY5.5、CY3、Texas Red、TFAM、TAMRA、VIC以及JOE中的一种或两种。

7.含有权利要求1～6任一项所述的引物探针组合产品的试剂盒。

8.根据权利要求7所述的试剂盒，其还含有dNTPs、Mg²⁺、适用于ARMS-PCR体系的DNA聚合酶、逆转录酶、PCR缓冲液、RNA酶抑制剂、阳性对照以及阴性对照中的至少一种。

9.根据权利要求8所述的试剂盒，所述阴性对照和阳性对照均为含有能够与待检测突变位点的检测引物在严格条件下互补配对的SARS-CoV-2核酸片段；所述阴性对照不含有待检测突变位点；所述阳性对照含有待检测突变位点。

10.权利要求1～6任一项所述的引物探针组合产品在制备用于检测突变的SARS-CoV-2病毒的试剂盒中的应用。

11.一种检测突变SARS-CoV-2病毒的方法，所述方法包括以下步骤：

a)获取待检测样本中的核酸；

b)使用权利要求1～6任一项所述的引物探针组合产品，或权利要求7～9任一项所述的试剂盒，以所述核酸为模板进行扩增以确定所述样本中是否存在N501Y、P681H及HV 69-70del三种突变形式的SARS-CoV-2病毒中的至少一种。

12.根据权利要求11所述的方法，在步骤b)中，进行扩增时，SEQ ID NO：1～6或SEQ IDNO：10～15所示的引物中，各引物的浓度均为0.2μM～0.4μM。

13.根据权利要求11所述的方法，在步骤b)中，进行扩增时，SEQ ID NO：7～9或SEQ IDNO：16～18所示的探针中，各探针的浓度均为0.1μM～0.2μM。