[发明专利]一种透明质酸检测试剂盒及其方法

权利要求书

1.一种透明质酸检测试剂盒，其特征在于该试剂盒包含试剂R1和R2和校准品，其中试剂R1中包含缓冲液、氯化钠、防腐剂以及稳定剂；试剂R2包含活化缓冲液、包被缓冲液、封闭液、贮存缓冲液，以及胶乳微球和HABP，以及偶联剂。

2.根据权利要求1所述的透明质酸检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1组分浓度为：缓冲液 0.1-100 mmol/L、氯化钠1-20g/L、防腐剂0.1-10g/L、稳定剂0.1-10 g/L；所述试剂R2组分浓度为：活化缓冲液 0.1-100 mmol/L、包被缓冲液 0.1-100 mmol/L、封闭液 0.1-100 mmol/L、贮存缓冲液 0.1-100 mmol/L、胶乳微球1-100ml/L、HABP 2-200ml/L、偶联剂10.1-5g/L，偶联剂2 0.05-2.5g/L。

3.根据权利要求2所述的透明质酸检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1组分浓度为：缓冲液 25mmol/L、氯化钠9g/L、防腐剂5g/L、稳定剂5 g/L；所述试剂R2组分浓度为：活化缓冲液50 mmol/L、包被缓冲液 50mmol/L、封闭液 25 mmol/L、贮存缓冲液 50 mmol/L、胶乳微球30ml/L、HABP 50ml/L、偶联剂1 1g/L，偶联剂2 0.5g/L。

4.根据权利要求1-3所述的透明质酸检测试剂盒，其特征在于，试剂R1中，所述的缓冲液为磷酸缓冲液、Tris-HCl，MES缓冲液、HEPES缓冲液、甘氨酸缓冲液中的一种或几种；试剂R2中，所述的活化缓冲液为磷酸缓冲液、Tris-HCl，MES缓冲液、HEPES缓冲液、甘氨酸缓冲液中的一种或几种，所述的包被缓冲液为磷酸缓冲液、Tris-HCl，MES缓冲液、HEPES缓冲液、甘氨酸缓冲液中的一种或几种，所述的封闭液液为磷酸缓冲液、Tris-HCl，MES缓冲液、HEPES缓冲液、甘氨酸缓冲液中的一种或几种，并在其中加入牛血清白蛋白，所述的贮存缓冲液为磷酸缓冲液、Tris-HCl，MES缓冲液、HEPES缓冲液、甘氨酸缓冲液中的一种或几种。

5.根据权利要求4所述的透明质酸检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1和试剂R2中的缓冲液的PH值为5.0-9.0。

6.根据权利要求1-3所述的透明质酸检测试剂盒，其特征在于，试剂R1中的稳定剂为PEG系列。

7.根据权利要求1-3所述的透明质酸检测试剂盒，其特征在于，试剂R1中的防腐剂为叠氮钠、亚硝酸钠、Proclin系列。

8.根据权利要求1-3所述的透明质酸检测试剂盒，其特征在于，试剂R2中的偶联剂为N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺（EDC）。

9.根据权利要求1-3所述的透明质酸检测试剂盒，其特征在于，试剂R2中的胶乳微球的粒径为0.08-0.5μm。

10.根据权利要求1-9所述，透明质酸检测试剂盒的检测方法包括如下步骤：

（1）依次加入试剂R1，待测样本，混匀，37℃下温育4-10分钟，后加入试剂R2，混匀，37℃温育4-10分钟后，600nm波长下测定吸光度；

（2）根据定标的标准曲线计算待测样品中透明质酸的浓度。

11.根据权利要求10所述，其特征在于，所述的标准曲线采用透明质酸校准品定标。

12.根据权利要求11所述，其特征在于，透明质酸校准品的浓度为0-1000ng/mL。