[发明专利]一种核黄素的发酵方法及所用发酵培养基

说明书

本申请涉及微生物发酵技术领域，尤其涉及一种核黄素的发酵方法及所用发酵培养基。一种核黄素的发酵方法，包括以下步骤：S1、种子活化；S2、种子培养；S3、发酵培养基配制；S4、酶解处理；S5、灭菌处理；S6、发酵培养。所用的发酵培养基，按重量百分比计算，其原料组成及含量如下：蔗糖3‑5%、酵母浸粉0.5‑1.5%、豆粕粉0.5‑0.8%、玉米蛋白粉0.5‑0.8%、棉籽饼粉0.3‑0.4%、甜菜碱0.15‑0.30%、氯化钠0.20‑0.30%、碳酸钙0.15‑0.40%、余量为水。本申请通过酶解将培养基中大分子裂解成小分子，具有能够增加出液体积，并提高发酵水平的优点。

技术领域

本申请涉及微生物发酵技术领域，更具体地说，它涉及一种核黄素的发酵方法及所用发酵培养基。

背景技术

核黄素(Riboflavin)又名维生素B2，化学名称7，8-二甲基-10-(D-1-核糖基)异咯嗪，分子式C₁₇H₂₀N₄O₆，是一种人和动植物必需的水溶性维生素，在医药行业、养殖业、种植业等领域有广泛应用。微生物发酵法是目前唯一被采用的核黄素工业化生产方法，常用的生产菌有枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、棉囊阿舒霉(Ashbya gossypii)、无名假丝酵母(Candidafamata)及阿舒假囊酵母(Eremotheciumashbya)。

目前，国内核黄素的发酵生产水平以50吨罐为例，单位浓度产量为20g/L,出液体积为35吨左右，主要研究方向集中在在菌种选育，培养基优化等方面，对于泡沫的控制多采用直接添加消泡剂，但随着发酵过程中补料的进行，消泡剂的添加量难以与发酵液保持适配，核黄素发酵过程中，消泡剂过多或过少，均会导致泡沫产生量过大，继而对生产水平造成巨大影响，主要体现在逃液、发酵罐实际装量减少，从而使得单罐产出减少。

发明内容

为了减少发酵过程中的泡沫产生，达到提高装液量、提升核黄素的发酵水平的目的，本申请提供一种核黄素的发酵方法及所用发酵培养基。

本申请提供的一种核黄素的发酵方法及所用发酵培养基采用如下的技术方案：

第一方面，本申请提供核黄素的发酵方法，采用如下的技术方案：

一种核黄素的发酵方法,包括以下步骤：

S1、种子活化：将甘油管保存的枯草芽孢杆菌自然解冻，挑取0.5-1.0mL枯草芽孢杆菌菌落接至装有活化培养基的三角瓶中，于培养箱中200-300r/min，37℃培养20-24h，得到活化种子；

所述枯草芽孢杆菌(Bacillus Subtilis)购买自中国工业微生物菌种保藏管理中心，保藏编号CICC20872，保藏日期2007年2月9日；

S2、种子培养：吸取S1中得到的活化种子按体积比计算，即活化种子：种子培养基的体积比为5-10：100，将活化种子接种于培养罐中的种子培养基，然后通过控制通气量在1V/V.M，溶氧量DO为20-40％，37℃进行培养20-24h，得到种子液；

S3、发酵培养基的配方及配制：

所述发酵培养基，按重量百分比计算，其原料组成及含量如下：

蔗糖3-5％

酵母浸粉0.5-1.5％

豆粕粉0.5-0.8％

玉米蛋白粉0.5-0.8％

棉籽饼粉0.3-0.4％

甜菜碱0.15-0.30％

氯化钠0.20-0.30％

碳酸钙0.15-0.40％

余量为水；