[发明专利]一种检测锌离子的荧光探针的制备方法

说明书

本申请涉及荧光分子探针的领域，具体公开了一种检测锌离子的荧光探针的制备方法，其包括如下步骤：1）在20‑25重量份的异丙醇‑水混合溶液中，加入4‑5重量份的对溴苯酚、DPA和甲醛，溴苯酚、DPA和甲醛的摩尔比为1:1:2，升高温度到50‑55℃，搅拌反应4‑5h，旋蒸除去溶剂，得中间产物；2）在20‑30重量份的二恶烷‑水的混合溶液中，加入步骤1）得到的中间产物、2‑萘硼酸、催化剂和碱，2‑萘硼酸与对溴苯酚的摩尔量相同，碱与2‑萘硼酸的摩尔比为（1.0‑2.5）：1，催化剂的用量为2‑萘硼酸的摩尔量的0.5‑2%，反应得锌离子荧光探针；其具有提高双（2‑吡啶甲基）胺型荧光探针的产率的优点。

技术领域

本申请涉及荧光分子探针的领域，更具体地说，它涉及一种检测锌离子的荧光探针的制备方法。

背景技术

锌是有机体内一种必不可少的微量元素，在细菌及动植物生长发育、组织修复、信号传输等生命活动中发挥着至关重要的作用。锌摄入过多或过少，都会造成机体内新陈代谢紊乱，引起很多疾病，危害生态环境和人类健康。随着人们对锌在生命活动中作用的认识的加深，细胞内锌的研究已成为多种交叉学科研究的热点，因此锌离子的检测也逐渐得到发展。

相关技术中，应用于检测锌离子的分子探针有双（2-吡啶甲基）胺型、大环多胺、联二吡啶、席夫碱、三氮唑衍生物等，其中，双（2-吡啶甲基）胺型，由于其灵敏度较高，被广泛应用。双（2-吡啶甲基）胺型分子的制备方法中一般包括Mannich反应和Suzuki反应。

针对上述中的相关技术，发明人认为，Suzuki反应中一般用到Pd(PPh₃)₄为催化剂，可以得到较快的反应速率，但其目标产物的产率较低。

发明内容

为了提高双（2-吡啶甲基）胺型荧光探针的产率，本申请提供一种检测锌离子的荧光探针的制备方法。

本申请提供的一种检测锌离子的荧光探针的制备方法采用如下的技术方案：

一种检测锌离子的荧光探针的制备方法，其包括如下步骤：

1）在20-25重量份的异丙醇-水混合溶液中，加入4-5重量份的对溴苯酚、DPA和甲醛，溴苯酚、DPA和甲醛的摩尔比为1:1:2，升高温度到50-55℃，搅拌反应4-5h，除去溶剂，得中间产物；

2）在20-30重量份的二恶烷-水的混合溶液中，加入步骤1）得到的中间产物、2-萘硼酸、催化剂和碱，2-萘硼酸与对溴苯酚的摩尔量相同，碱与2-萘硼酸的摩尔比为（1.0-2.5）：1，催化剂的用量为2-萘硼酸的摩尔量的0.5-2%，在70-75℃下进行反应8-10h，得锌离子荧光探针；

其中，其催化剂是通过二氯化钯、硝酸镍与三苯基膦反应制得。

通过采用上述技术方案，制备的催化剂可以提高催化剂的选择性，从而提高目标产物的产率，然后对反应原料和其添加量及比例进行选择，其添加助剂，如碱的添加等，使其最终的目标产物，即锌离子荧光探针的产率较高，大大提高了生产效率。

优选的，所述步骤2）中的催化剂的制备步骤如下：

1）在惰性气体氛围下，在15-18重量份的DMF中加入1.3-2重量份的金属化合物，金属化合物为二氯化钯和硝酸镍，二氯化钯和硝酸镍的摩尔比为1:（0.01-0.04），搅拌至溶解，继续加入三苯基膦，二氯化钯与硝酸镍的总摩尔量和三苯基膦的摩尔量之比为4.5:1，在130-135℃下，反应7-10h，得混合液；

2）在步骤1）得到的混合液中加入与二氯化钯的摩尔量相同的水合肼，在105-110℃下，反应1.5-2h，然后升高温度到130-140℃，继续反应4-7h，氮气压滤，洗涤，得催化剂。

通过采用上述技术方案，通过金属化合物中的金属离子与三苯基膦进行配位，然后将其金属离子中的钯通过水合肼还原，可以得到催化剂。

优选的，所述步骤1）中二氯化钯和硝酸镍的摩尔比为1:（0.02-0.03）。