[发明专利]一种oligos标记抗体的方法及其标记得到的抗体在审
申请号: | 202110596492.5 | 申请日: | 2021-05-31 |
公开(公告)号: | CN113024665A | 公开(公告)日: | 2021-06-25 |
发明(设计)人: | 严崇虎;李国平;刘正权 | 申请(专利权)人: | 泛肽生物科技(浙江)有限公司 |
主分类号: | C07K16/00 | 分类号: | C07K16/00;C07K1/13;G01N33/532;G01N33/543 |
代理公司: | 浙江中桓凯通专利代理有限公司 33376 | 代理人: | 谢英 |
地址: | 315000 浙江省宁波市*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 oligos 标记 抗体 方法 及其 得到 | ||
1.一种oligos标记抗体的方法,其特征在于,包括以下步骤:
获取生物素-oligos复合物和生物素-抗体复合物;
使用链霉亲和素将所述生物素-oligos复合物和所述生物素-抗体复合物交联得到oligos-生物素-链霉亲和素-生物素-抗体复合物。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述生物素-oligos复合物和所述链霉亲和素的摩尔比为(1-4):1。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述生物素-oligos复合物或所述生物素-抗体复合物的制备包括:
对生物素进行活化,得到活化的生物素;
将所述活化的生物素与抗体或oligos混合,室温旋转反应,得到所述生物素-抗体复合物或所述生物素-oligos复合物。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述oligos的5’端或3’端修饰有氨基;使用交联剂将所述活化的生物素连接在所述氨基上;所述交联剂包括β-氰乙基亚磷酰胺、四氮唑或核苷亚磷酰胺。
5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述oligos的碱基片段长度为2-100bp。
6.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述oligos与所述活化的生物素混合的摩尔比为1:(1-20)。
7.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述对生物素进行活化,包括以下步骤:
将生物素与EDC和NHS混合,室温旋转反应15-25分钟,得到活化的生物素;其中,生物素与EDC摩尔比为10:1,生物素与NHS摩尔比为10:1。
8.一种oligos标记的抗体,其特征在于,所述oligos标记的抗体为由权利要求1-7任一项所述的方法标记得到的oligos-生物素-链霉亲和素-生物素-抗体复合物。
9.根据权利要求8所述的oligos标记的抗体,其特征在于,所述oligos-生物素-链霉亲和素-生物素-抗体复合物中,抗体与oligos的摩尔比为(0.3-1):1。
10.一种捕获抗体,其特征在于,与权利要求8或9所述的oligos标记的抗体配对连接;用于连接所述oligos标记的抗体并且吸附在酶标板上,或者,用于连接所述oligos标记的抗体和磁珠。
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