[发明专利]最适pH降低的几丁二糖脱乙酰酶组合突变体及应用

权利要求书

1.一种最适pH降低的几丁二糖脱乙酰酶组合突变体，其特征在于，所述组合突变体由氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的几丁二糖脱乙酰酶突变得到；其中，突变位点为

第74位的甘氨酸G突变为天冬氨酸D、第152位的组氨酸H突变为谷氨酸E、第168位的苯丙氨酸F突变为丙氨酸A、第232位的色氨酸W突变为丙氨酸A、第29位的谷氨酰胺Q突变为谷氨酸E、第106位的赖氨酸K突变为谷氨酸E和第176位的天冬酰胺N突变为谷氨酸E；

或第74位的甘氨酸G突变为天冬氨酸D、第152位的组氨酸H突变为谷氨酸E、第168位的苯丙氨酸F突变为丙氨酸A、第232位的色氨酸W突变为丙氨酸A、第29位的谷氨酰胺Q突变为谷氨酸E、第106位的赖氨酸K突变为谷氨酸E、第176位的天冬酰胺N突变为谷氨酸E和第221位的精氨酸R突变为谷氨酸E；

或第74位的甘氨酸G突变为天冬氨酸D、第152位的组氨酸H突变为谷氨酸E、第168位的苯丙氨酸F突变为丙氨酸A、第232位的色氨酸W突变为丙氨酸A、第29位的谷氨酰胺Q突变为谷氨酸E、第106位的赖氨酸K突变为谷氨酸E、第176位的天冬酰胺N突变为谷氨酸E、第221位的精氨酸R突变为谷氨酸E和第271位的亮氨酸L突变为谷氨酸E。

2.编码权利要求1所述组合突变体的基因。

3.携带权利要求1所述组合突变体的重组表达载体。

4.根据权利要求3所述的重组表达载体，其特征在于：所述重组表达载体以p43NMK为原始表达载体。

5.表达权利要求1所述组合突变体的细胞。

6.根据权利要求5所述的细胞，其特征在于：所述细胞为枯草芽孢杆菌。

7.根据权利要求6所述的细胞，其特征在于：所述枯草芽孢杆菌以B.subtilis WB600为宿主。

8.含权利要求1所述组合突变体的组合物。

9.权利要求1所述的组合突变体、权利要求2所述的基因、权利要求3或4所述的重组表达载体、权利要求5-7任一项所述的细胞或权利要求8所述的组合物在合成氨基葡萄糖或含氨基葡萄糖产品中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：以所述组合突变体、所述组合物或所述细胞发酵得到的含有所述组合突变体的上清液为催化剂，以N-乙酰氨基葡萄糖为底物生产氨基葡萄糖。