[发明专利]一种绞股蓝皂苷gypenoside L和gypenoside LI的制备方法

说明书

绞股蓝皂苷gypenoside L和gypenoside LI为同分异构体，色谱方法分离效果差，本发明提供了一种绞股蓝皂苷gypenoside L和gypenoside LI的制备方法。以含有gypenoside L和gypenoside LI的混合物为起始原料，使用醋酐使gypenoside L和gypenoside LI在低温条件酸催化反应得到gypenoside L和gypenoside LI的乙酰化产物，gypenoside L和gypenoside LI的乙酰化产物利用硅胶柱色谱就易分离纯化，再将gypenoside L和gypenoside LI乙酰化产物在不同碱性条件下反应分别获得gypenoside L和gypenoside LI。本发明为一种新的制备方法，成本低，易获得。

技术领域

本发明公开以含有绞股蓝皂苷gypenoside L和gypenoside LI的混合物为原料制备绞股蓝皂苷gypenoside L和gypenoside LI的方法，涉及乙酰化制备方法和碱降解制备方法及纯化步骤，属于药物制备技术领域。

背景技术

绞股蓝为葫芦科(Cucurbitaceae)绞股蓝属(Gynostemma)绞股蓝Gynostemmapentaphyllum(Thunb.)Makino的全草，具有清热解毒，止咳祛痰等功能。

绞股蓝中最主要的药效成分是皂苷类成分。研究表明，绞股蓝又名“南方人参”，其价格远远低于人参，但药用价值可以与人参相媲美；生命力极其顽强，扦插即活，极易实现机械化种植；成药时间短，绞股蓝皂苷种类多且易得，本身含有Rb1、Rg3等人参皂苷成分，一定程度上可作为人参替代资源。

绞股蓝皂苷gypenoside L、gypenoside LI具有广谱的抗肿瘤作用，但由于这2个皂苷成分是同分异构体，很难利用极性吸附原理或分子筛原理进行分离和纯化。传统的分离纯化手段存在时间耗费较长、浓缩较困难、纯度较低等缺点。在这里我们提出了一种新的同分异构体分离方法，即通过将富含gypenoside L和gypenoside LI的部位进行乙酰化反应使二者的理化性质发生改变，通过运用硅胶柱色谱进行分离，再分别用氢氧化钠进行降解反应，从而实现高效的gypenoside L和gypenoside LI的分离纯化。该方法显著的缩短分离纯化所需要的时间，同时提高化合物纯度，由于绞股蓝中存在许多同分异构体，这也为分离绞股蓝中其他同分异构体提供了一个新的思路。

发明内容

本发明提供了一种以含有绞股蓝皂苷gypenoside L和gypenoside LI的混合物制备绞股蓝皂苷gypenoside L和gypenoside LI的方法，以含有gypenoside L和gypenosideLI的混合物作为原料，使用醋酐在低温条件酸催化反应得到gypenoside L和gypenosideLI的乙酰化产物，再将gypenoside L和gypenoside LI乙酰化产物在不同碱性条件下反应分别获得gypenoside L和gypenoside LI，本发明为一种新的制备方法，成本低，易获得。

本发明所述的一种以含有绞股蓝皂苷gypenoside L和gypenoside LI的混合物为原料制备gypenoside L和gypenoside LI的方法，步骤如下：

(1)将植物绞股蓝的干燥叶的粗粉在120℃、0.24MPa热处理3h，热处理加工后，加入80％乙醇水溶液(1∶8，w/v)，加热回流提取3次，每次2h，提取液减压回收溶剂，得乙醇提取浸膏；

(2)将乙醇提取浸膏通过HP-20型大孔树脂，用95％乙醇进行洗脱，95％乙醇洗脱液减压浓缩，得95％乙醇洗脱物；将95％乙醇洗脱物上硅胶柱色谱，用20∶1～1∶1体积比的二氯甲烷/甲醇洗脱，分段收集洗脱液得到7个组分，将其中第6个组分运用制备型HPLC进行分离，得到gypenoside L和gypenoside LI的富集部位；