[发明专利]一种利用膜荚黄芪种子提取膜荚黄芪凝集素蛋白的方法

权利要求书

1.一种利用膜荚黄芪种子提取膜荚黄芪凝集素蛋白的方法，以膜荚黄芪种子为原料，其特征在于，包括以下步骤：

S1、预处理：

先将原料用25-35℃的清水进行冲洗，冲洗时间为12-25分钟，然后将种子去壳、碾碎，浸泡在40-55摄氏度的温水中1.5-3天，然后将其搅拌成浆液；

S2、提取：

通过40um微孔滤膜进行过滤水分，然后向浆液中加入浆液体积2％-5％琼脂粉、并与浆液搅拌均匀，然后置于离心机中进行，18000r/min、离心20min，收集上清液，再加入20mmol/L、pH7.0的PBS缓冲液30ml进行溶解，放进透析袋中进行透析，多次透析后得到初产品；

S3、纯化：

将得到的初产品分离纯化，用18mmol/l、pH7.0Tris-HCl缓冲液洗脱，调节流速在0.8ml/min，收集各个洗脱峰；经SUPERDEX-G25分子筛层析后，得到一个主要的蛋白峰，即为膜荚黄芪凝集素蛋白AML；

S4、检测：

对纯化后的产品进行蛋白质含量检测为75％-83％。

2.根据权利要求1所述的一种利用膜荚黄芪种子提取膜荚黄芪凝集素蛋白的方法，其特征在于：所述S1中浸泡时温水与原料的体积比为1.2-1.5：1，所述浸泡过程中对水温进行恒温加热。

3.根据权利要求1所述的一种利用膜荚黄芪种子提取膜荚黄芪凝集素蛋白的方法，其特征在于：所述S1中的搅拌包括机械搅拌和超声波搅拌，先进行机械搅拌10-15min，然后进行超声波搅拌10-25min，使其完全成为浆液。

4.根据权利要求1所述的一种利用膜荚黄芪种子提取膜荚黄芪凝集素蛋白的方法，其特征在于：所述对初产品进行蛋白质含量检测为45％-62％。

5.根据权利要求1所述的一种利用膜荚黄芪种子提取膜荚黄芪凝集素蛋白的方法，其特征在于：所述预处理、提取、纯化得到的产品均在-15℃至-18℃的冷冻箱内部保存。

6.根据权利要求1所述的一种利用膜荚黄芪种子提取膜荚黄芪凝集素蛋白的方法，其特征在于：所述S1中浸泡时加入温水体积1％-5％的精盐。

7.根据权利要求1所述的一种利用膜荚黄芪种子提取膜荚黄芪凝集素蛋白的方法，其特征在于：所述对纯化后的产品进行含糖量检测为16％-25％。