[发明专利]一种检测杧果细菌性角斑病菌的引物组及方法和应用有效
| 申请号： | 202110609320.7 | 申请日： | 2021-06-01 |
| 公开（公告）号： | CN113337625B | 公开（公告）日： | 2022-08-09 |
| 发明（设计）人： | 姜伟;覃梅静;别凤枝;何勇强;唐纪良 | 申请（专利权）人： | 广西大学 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/64 |
| 代理公司： | 成都知棋知识产权代理事务所(普通合伙) 51325 | 代理人： | 马超前 |
| 地址： | 530004 广西壮族*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 细菌性 角斑病 引物 方法 应用 | ||
1.一种检测杧果细菌性角斑病菌的引物组，其特征在于，包括引物对XcmU1-FR、XcmU2-FR和XcmU3-FR，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1～2、SEQ ID NO.3～4和SEQ ID NO.5～6所示。
2.一种检测杧果细菌性角斑病菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)提取待检测样品的总DNA；
2)以待检测样品总DNA为模板，利用引物对XcmU1-FR、XcmU2-FR和XcmU3-FR分别进行PCR扩增；所述引物对XcmU1-FR、XcmU2-FR和XcmU3-FR核苷酸序列依次如SEQ ID NO.1～2、SEQ ID NO.3～4和SEQ ID NO.5～6所示；
3)扩增产物进行凝胶电泳，依据凝胶电泳结果进行判断：若能扩增出大小分别为297bp、237bp和357bp的产物中的任意一条或多条产物，则认为该样品中存在杧果细菌性角斑病菌。
3.根据权利要求2所述的一种检测杧果细菌性角斑病菌的方法，其特征在于，所述的PCR扩增体系为：待检测样品总DNA 1～3μL，引物各0.2μL，10mM dNTPs 0.2μL，EasyTaq DNAPolymerase 0.2μL，10×EasyTaq Buffer 2.0μL，ddH2O 14.2～16.2μL，总体系为20μL。
4.根据权利要求2所述的一种检测杧果细菌性角斑病菌的方法，其特征在于，所述的PCR扩增程序为：95℃8min；95℃30s，60℃30s，72℃30s，30个循环；72℃10min。
5.权利要求1所述的引物组在检测杧果细菌性角斑病菌中的应用。
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