[发明专利]一种检测恩诺沙星和金刚烷胺的两用试纸条及其制备方法和检测方法

权利要求书

1.一种检测恩诺沙星和金刚烷胺的两用试纸条，其特征在于，所述试纸条包括底板，在所述底板的表面沿层析方向依次铺设有样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，且所述样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫依次固定连接，所述硝酸纤维素膜上包被有两条检测线和质控线，两条所述检测线是指包被有金刚烷胺抗原的检测线和包被有恩诺沙星抗原的检测线，所述质控线是指包被有X抗鼠IgG的质控线；所述胶体金结合垫上设有金刚烷胺抗体、恩诺沙星抗体和胶体金的偶联物；所述X为羊或兔。

2.一种如权利要求1所述的检测恩诺沙星和金刚烷胺的两用试纸条的制备方法，其特征在于，其包括如下步骤：

在所述底板上，将所述样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫拼接为试纸条；

所述硝酸纤维素膜上包被有两条检测线和质控线。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法还包括在所述硝酸纤维素膜上间隔包被浓度为0.3-0.8mg/mL的金刚烷胺抗原和浓度为0.3-0.8mg/mL的恩诺沙星抗原作为检测线，并在所述硝酸纤维素膜上包被0.3-0.8mg/mL的X抗鼠IgG作为质控线，且所述质控线与所述检测线间隔设置。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，在所述硝酸纤维膜上，每0.3-2cm长度上喷1-6μL的金刚烷胺抗原或恩诺沙星抗原作为两条检测线，每0.3-2cm长度上喷1-6μL的X抗鼠IgG作为质控线，相邻两条线之间的间距为0.2-0.5cm；

所述制备方法还包括在所述硝酸纤维膜上喷设两条检测线和质控线后进行干燥。

5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，在将所述样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫进行拼接之前还包括制备金刚烷胺抗体、恩诺沙星抗体和胶体金的偶联物，并将所述金刚烷胺抗体、恩诺沙星抗体和胶体金的偶联物喷于结合垫上制得所述胶体金结合垫，所述胶体金结合垫包括胶体金－金刚烷结合垫和胶体金－恩诺沙星结合垫；

所述金刚烷胺抗体、恩诺沙星抗体和胶体金的偶联物的制备包括：分别制备金刚烷胺抗体与胶体金的偶联物和恩诺沙星与胶体金的偶联物，将所述金刚烷胺抗体与胶体金的偶联物喷于结合垫上制得胶体金－金刚烷结合垫，将所述恩诺沙星与胶体金的偶联物喷于结合垫上制得胶体金－恩诺沙星结合垫；

所述金刚烷胺抗体与胶体金的偶联物的制备包括：将胶体金溶液、硼酸钾溶液、金刚烷胺抗体溶液和牛血清白蛋白溶液混合制得混合液，离心后的沉淀用磷酸缓冲液PB复溶制得金刚烷胺抗体和胶体金的偶联物；

所述恩诺沙星抗体和胶体金的偶联物的制备包括：将胶体金溶液、硼酸钾溶液、恩诺沙星抗体溶液和牛血清白蛋白溶液混合制得混合液，离心后的沉淀用磷酸缓冲液PB复溶制得金刚烷胺抗体和胶体金的偶联物；

每1mL胶体金溶液中添加2.5－3.5μL浓度为2mg/mL的金刚烷胺抗体溶液或1.5－2.5μL浓度为2mg/mL的恩诺沙星抗体溶液，添加0.1M的硼酸钾溶液30－50μL，添加25－45μL的0.5－1.5wt％BSA溶液；

优选地，在将所述金刚烷胺抗体溶液或所述恩诺沙星抗体溶液加入混合前还包括对金刚烷胺抗体或所述恩诺沙星抗体进行透析和复溶处理；所述透析是依次使用磷酸缓冲液PB以及蒸馏水进行透析，并用超纯水进行复溶；

优选地，在将所述结合垫上喷金前还包括对结合垫进行预处理，所述预处理是将含0.5－1.5wt％牛血清白蛋白和0.5－1.5％吐温－20溶液的0.005－0.015M PBS溶液均布在所述结合垫上，并干燥。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，离心后的沉淀用磷酸缓冲液PB和5－10wt％的蔗糖复溶；

优选地，每1－2cm的结合垫上喷2－5μL的所述金刚烷胺抗体和胶体金的偶联物；每1－2cm的结合垫上喷2－5μL的所述恩诺沙星抗体和胶体金的偶联物。

7.一种同时检测恩诺沙星和金刚烷胺的试剂盒，其特征在于，其包括权利要求1所述的检测恩诺沙星和金刚烷胺的两用试纸条以及壳体。