[发明专利]一种检测恩诺沙星和金刚烷胺的两用试纸条及其制备方法和检测方法

说明书

本发明公开了一种检测恩诺沙星和金刚烷胺的两用试纸条及其制备方法和检测方法，涉及分子检测技术领域。通过两条检测线可同时检测金刚烷胺与恩诺沙星两种物质，而无需任何仪器设备，操作简便快捷，手动操作同时通过肉眼即可读取结果，大大提高了实地现场检测金刚烷胺与恩诺沙星残留超标的效率，在恩诺沙星和金刚烷胺药物的快速免疫检测应用中将有广阔的前景，同时上述两用试纸条的提出也为市场监测提供了强力保障。该试纸条具有特异性好，稳定性好的优势。此外，还提供了一种检测恩诺沙星和/或金刚烷胺的方法，该检测方法可以满足恩诺沙星和金刚烷胺的快速精准检出。

技术领域

本发明涉及分子检测技术领域，具体而言，涉及一种检测恩诺沙星和金刚烷胺的两用试纸条及其制备方法和检测方法。

背景技术

恩诺沙星是第三代氟喹诺酮类广谱抗菌药，由于碱性分子的逐渐变化，恩诺沙星的抗菌性能大大提高，药代动力学得到改善，而不良反应的可能性降低，作为抗菌药物广泛应用于细菌和支原体感染等。恩诺沙星能够靶向抑制细菌促旋酶和拓扑异构酶的合成，从而对细菌的复制和生长阶段造成影响。根据国家规定恩诺沙星最高残留限量为0.1mg/mL。大剂量的恩诺沙星摄入会导致动物急性中毒；长期低剂量摄入也会使动物机体产生抗药性，而不科学滥用还会引发药物残留，经过食物链从而对人类健康产生很大危害。

恩诺沙星的化学名为1-环丙基-7-(4-乙基-1-哌嗪基)-6-氟-1,4-二氢-4-氧代-3-喹啉羧酸，属于由萘啶酸核心结构衍生而成的6-氟喹诺酮或4-喹诺酮类化合物。CAS登记号为93106-60-6，分子式为C₁₉H₂₂FN₃O₃，相对分子质量为359.39，化学结构式如下：

金刚烷胺是一种三环胺，自20世纪60年代起首次作为抗病毒药物使用，其通过增加多巴胺的释放、阻断再摄取、增加突触后多巴胺受体或改变其构象来调节多巴胺活性，同时也是n-甲基-d-天冬氨酸(NMDA)受体，作为神经药物及止痛镇痛剂广泛应用于人类及动物治疗等多种场合(例如作为兽药)。分子式为C₁₀H₁₇N，相对分子量为151.249，化学结构式如下所示：

近年来动物源性食品中金刚烷胺与恩诺沙星检测超标事件时有发生，根据2020年市场监管总局发布的不合格产品情况通报，在流通量较大的禽类产品中，金刚烷胺与恩诺沙星检出频率尤为突出。目前国内外已发表的文献中，金刚烷胺和恩诺沙星检测方法主要有仪器检测法、荧光分光光度法和免疫分析方法等，但这些方法或需要昂贵的仪器设备，检测费用高，或操作时间长，操作技术要求高且不能用于现场检测。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种检测恩诺沙星和金刚烷胺的两用试纸条及其制备方法和检测方法以解决上述技术问题，从而建立一种快速、可靠、低成本的能够同时检测金刚烷胺与恩诺沙星的分析方法。

本发明是这样实现的：

本发明提供了一种检测恩诺沙星和金刚烷胺的两用试纸条，试纸条包括底板，在底板的表面沿层析方向依次铺设有样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，且样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫依次固定连接，硝酸纤维素膜上包被有两条检测线和质控线，两条检测线是指包被有金刚烷胺抗原的检测线和包被有恩诺沙星抗原的检测线，质控线是指包被有X抗鼠IgG的质控线；胶体金结合垫上设有金刚烷胺抗体、恩诺沙星抗体和胶体金的偶联物；X为羊或兔。

本发明还提供了一种检测恩诺沙星和金刚烷胺的两用试纸条的制备方法，其包括如下步骤：

在底板上，将样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫拼接为试纸条；

硝酸纤维素膜上包被有两条检测线和质控线。