[发明专利]葛根素6′′-O-乙酸酯的酶促合成方法

权利要求书

1.一种以双醋瑞因为酰基供体酶促合成葛根素6″-O-乙酸酯的方法，其特征在于，

a)麦芽糖-O-酰基转移酶MAT或其突变体MAT-E125V，MAT-E125M，MAT-E125R为生物催化剂；

b)葛根素为受体底物；

c)双醋瑞因为供体底物；

d)MAT或其突变体MAT-E125V，MAT-E125M，MAT-E125R催化葛根素和双醋瑞因合成葛根素6″-O-乙酸酯。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述供体底物双醋瑞因的分子结构式如下：

3.一种以乙酰辅酶A为酰基供体酶促合成葛根素6″-O-乙酸酯的方法，其特征在于，

a)麦芽糖-O-酰基转移酶MAT或其突变体MAT-E125N，MAT-E125T，MAT-E125P为生物催化剂；

b)葛根素为受体底物；

c)乙酰辅酶A为供体底物；

d)MAT或其突变体MAT-E125N，MAT-E125T，MAT-E125P催化葛根素和乙酰辅酶A合成葛根素6″-O-乙酸酯。

4.根据权利要求1或3所述的方法，其特征在于，所述的葛根素6″-O-乙酸酯的分子结构式如下：

5.根据权利要求1或3所述的方法，其特征在于，所述的麦芽糖-O-酰基转移酶MAT，其氨基酸序列选自SEQ ID NO.1，核苷酸序列选自SEQ ID NO.2。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述麦芽糖-O-酰基转移酶突变体MAT-E125V，MAT-E125M，MAT-E125R，其氨基酸序列选自SEQ ID NO.3，SEQ ID NO.5，SEQ IDNO.7，核苷酸序列选自SEQ ID NO.4，SEQ ID NO.6，SEQ ID NO.8。

7.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述麦芽糖-O-酰基转移酶突变体MAT-E125N，MAT-E125T，MAT-E125P，其氨基酸序列选自SEQ ID NO.9，SEQ ID NO.11，SEQ IDNO.13，核苷酸序列选自SEQ ID NO.10，SEQ ID NO.12，SEQ ID NO.14。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述合成葛根素6″-O-乙酸酯是在酶催化体系中进行的，双醋瑞因与葛根素分别为供受体底物；反应温度为20～80℃；反应pH为3～9。

9.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述合成葛根素6″-O-乙酸酯是在酶催化体系中进行的，乙酰辅酶A与葛根素分别为供受体底物；反应温度为20～80℃；反应pH为3～7。

10.根据权利要求1或3所述的方法，其特征在于，合成葛根素6″-O-乙酸酯所涉及的生物催化剂能够以粗酶、纯酶、固定化和全细胞的形式存在。

11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，所述的全细胞选自大肠杆菌。

12.一种含有权利要求5-7任一项所述的核苷酸序列的表达载体。

13.根据权利要求12所述的表达载体，其特征在于，所述表达载体的宿主细胞选自大肠杆菌。