[发明专利]检测对虾VPAHPND急性菌株和亚急性菌株的方法在审
| 申请号： | 202110613088.4 | 申请日： | 2021-06-02 |
| 公开（公告）号： | CN113337626A | 公开（公告）日： | 2021-09-03 |
| 发明（设计）人： | 沈辉;蒋葛;乔毅;万夕和;成婕;范贤平;刘学实;李浩澜;窦彦斌;王李宝;黎慧;史文军 | 申请（专利权）人： | 江苏省海洋水产研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/63 |
| 代理公司： | 北京东方盛凡知识产权代理事务所(普通合伙) 11562 | 代理人： | 张换君 |
| 地址： | 226000 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 检测 对虾 vpahpnd 急性 菌株 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种检测VPAHPND急性菌株和亚急性菌株的引物，其特征在于，包括用于检测VPAHPND毒力因子PirA和PirB的引物对，所述引物对为：
PirA-F：5’-CGTGGGGAGCTTACCATTCA-3’；
PirA-R：5’-AAACCACGACTAGCGCCATT-3’；
PirB-F：5’-AAACTTCGGTTATGCTGCGG-3；
PirB-R：5’-CACCAACTACGAGCACC CAT-3’。
2.利用权利要求1所述的引物检测VPAHPND急性菌株和亚急性菌株的方法，其特征在于，包括以煮沸后的菌液上清为模板DNA，利用多重PCR方法对VPAHPND毒力因子PirA和PirB进行扩增的步骤。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，扩增反应体系为25μL，包括10×PCR缓冲液2.5μL，dNTPs mixture 2μL，4种引物各0.5μL，模板DNA 1μL，rTaq酶0.20μL。
4.如权利要求2所述的方法，其特征在于，扩增反应条件：94℃5min；94℃30s，60℃30s，72℃40s，30个循环；72℃5min。
5.一种检测VPAHPND急性菌株和亚急性菌株的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述的引物。
6.一种如权利要求5所述的试剂盒在检测VPAHPND急性菌株和亚急性菌株中的应用。
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