[发明专利]一种扩增白纹伊蚊nad1基因的引物组、试剂盒及利用其测序的方法

权利要求书

1.一种扩增白纹伊蚊nad1基因的引物组，其特征在于，所述引物组包括白纹伊蚊nad1基因的上游引物和下游引物，且

所述上游引物Ab-nad1-F:5’-TATCATAACNAAACCGAGGC-3’；

所述下游引物Ab-nad1-R:5’-TTAGTAGTTTGTGTAATAGTAGGAGTAGC-3’；

其中，所述“N”表示选自A、T、G和C中的一个碱基。

2.一种用以扩增白纹伊蚊nad1基因的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括PCR反应液和权利要求1所述的引物组，且所述引物组是分散在所述PCR反应液中。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述PCR反应液中还包含DNA聚合酶。

4.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述上游引物和所述下游引物浓度分别为40-50pmol/uL。

5.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述DNA聚合酶为Taq酶和/或Pfu酶。

6.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述DNA聚合酶的浓度为2-7U/uL。

7.一种利用白纹伊蚊nad1基因的引物组测序的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1:提取待测样本模板DNA；

S2：将权利要求1所述的引物组与所述待测样本模板DNA配制成反应体系进行PCR扩增，得到PCR扩增产物；或

将权利要求2-6任一所述试剂盒的PCR反应液与所述待测样本模板DNA配成反应体系进行PCR扩增，得到PCR扩增产物；

S3：检测所述PCR扩增产物，确定所述PCR扩增产物为阳性；

S4：对S3中确定为阳性的PCR扩增产物进行DNA序列测定。

8.根据权利要求7所述利用白纹伊蚊nad1基因的引物组测序的方法，其特征在于，所述反应体系中各组分含量如下：上游引物，40-50pmol/uL；下游引物，40-50pmol/uL；DNA聚合酶，2-7U/uL；待测样本模板DNA，10-50ng/μL；以及构建所述反应体系的ddH2O。

9.根据权利要求7所述利用白纹伊蚊nad1基因的引物组测序的方法，其特征在于，所述PCR扩增的反应程序为：95℃(预变性)，5min；95℃(变性)，30s；53℃-56℃(退火)，30s；72℃(延伸)，1.5min；35个循环；72℃(延伸)，5min。

10.根据权利要求7所述利用白纹伊蚊nad1基因的引物组测序的方法，其特征在于，所述S3中检测所述PCR扩增产物的方法为凝胶电泳法。