[发明专利]一种用于制备L-塔格糖的双酶催化体系及应用在审
申请号: | 202110620147.0 | 申请日: | 2021-06-03 |
公开(公告)号: | CN113337484A | 公开(公告)日: | 2021-09-03 |
发明(设计)人: | 苏文彬;范小蔓;黄佳滢;李学勇;张业旺 | 申请(专利权)人: | 江苏大学 |
主分类号: | C12N9/04 | 分类号: | C12N9/04;C12N9/02;C12P19/02 |
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地址: | 212013 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 制备 塔格糖 催化 体系 应用 | ||
1.一种用于制备L-塔格糖的双酶催化体系,其特征在于,所述双催化体系包含NADH氧化酶、半乳糖醇脱氢酶和NAD+辅酶因子,其中,体系中NADH氧化酶、半乳糖醇脱氢酶和NAD+辅酶因子用量比为1-1.5 U/mL:2-2.25 U/mL:1~3 mM。
2.根据权利要求1所述的用于制备L-塔格糖的双酶催化体系,其特征在于,所述NADH氧化酶为变形链球菌的产水型NADH氧化酶。
3.根据权利要求1所述的用于制备L-塔格糖的双酶催化体系,其特征在于,所述半乳糖醇脱氢酶为球形红球菌的半乳糖醇脱氢酶。
4.权利要求1~3中任一项所述用于制备L-塔格糖的双酶催化体系在生物催化合成L-塔格糖中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,包括:
将D-半乳糖醇用Tris-HCl缓冲液溶解,然后加入半乳糖醇脱氢酶液和NADH氧化酶液,然后加入NAD+辅酶因子,得到反应体系,磁力搅拌反应,得到L-塔格糖。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述Tris-HCl缓冲液的pH值为9.0。
7.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,D-半乳糖醇用Tris-HCl缓冲液溶解后浓度为100 mM。
8.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述半乳糖醇脱氢酶在反应体系中的终浓度为1~1.5 U/mL,NADH氧化酶酶液在反应体系中的终浓度为2~2.25 U/mL。
9.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述NAD+辅酶因子的添加量为1~3 mM。
10.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述磁力搅拌反应的条件为:在pH值为7.0-9.0的条件下,在5-50℃反应12-26h。
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