[发明专利]一种从牛蒡子提取共轭亚油酸的方法及其共轭亚油酸产品

权利要求书

1.一种从牛蒡子提取共轭亚油酸的方法，其特征是，该方法包括以下步骤：

(1)采用锅具将牛蒡子在100～150℃下炒制5～10min；

(2)将炒制后的牛蒡子进行粉碎，粉碎后进行超声波提取，提取介质为乙醚，超声波条件为：超声频率为20～40kHz，功率为100～300W，温度30～50℃，超声时间为20～60min；超声波处理结束后，加入无水硫酸钠，过滤，滤液减压蒸馏回收乙醚，获得油状物质；

(3)将油状物质、吐温-80、胆酸钠和水按照质量比例1:0.2～0.3:0.001～0.003:1～2混合，进行均质反应，形成乳化反应体系；

(4)向乳化反应体系加入磷酸盐缓冲液和米根霉脂肪酶，进行酶解反应，获得酶解液；

其中，酶解温度30～45℃，酶解时间为30～180min，pH为7.0～7.5，米根霉脂肪酶的用量为200～300U/mL_{乳化反应体系}；

(5)将向步骤(4)中的酶解液加入保加利亚乳杆菌培养液进行共轭亚油酸转化，调节转化体系pH为4～6，转化温度为30～45℃，转化时间为20～24h，获得共轭亚油酸转化液；

(6)将尿素和乙醇混合，加入步骤(5)中的共轭亚油酸转化液，水浴回流30～60min，反应结束后冷却至室温；然后在2～4℃下放置18～24h，析出结晶，过滤，采用乙醚洗涤结晶，获得的滤液去除乙醚，加入无水硫酸钠脱水，即可获得高纯度的共轭亚油酸。

2.如权利要求1所述的方法，其特征是：步骤(2)中，超声波条件为：超声频率为35kHz，功率为150W，温度35℃，超声时间为30min。

3.如权利要求1所述的方法，其特征是：步骤(3)中，所述油状物质、吐温-80、胆酸钠和水的质量比例为1:0.25:0.002:1.5。

4.如权利要求1所述的方法，其特征是：步骤(3)中，采用均质机进行均质，均质条件为：均质压力为20～40MPa，均质温度为30～50℃，均质时间为5～15min。

5.如权利要求1所述的方法，其特征是：步骤(4)中，酶解反应温度为35℃，pH为7.4，酶用量为240U/mL_{乳化反应体系}。

6.如权利要求1所述的方法，其特征是：步骤(5)中，保加利亚乳杆菌培养液是通过以下方法制备得到的：

将保加利亚乳杆菌接种至MRS斜面培养基上，35～40℃培养24～48h后，接种至脱脂乳培养基中，35～40℃培养12～24h，获得种子液；

向脱脂乳培养基中加入步骤(4)中的含有亚油酸的酶解液，接种种子液，35～40℃培养24～36h，获得保加利亚乳杆菌培养液。

7.如权利要求1所述的方法，其特征是：步骤(5)中，采用摇床培养转化，摇床转速为50～100rpm。

8.如权利要求1所述的方法，其特征是：步骤(5)中，酶解液与保加利亚乳杆菌培养液的体积比例为1：(1～3)。

9.如权利要求1所述的方法，其特征是：步骤(6)中，所述尿素、乙醇和步骤(5)中的共轭亚油酸转化液添加量比为1g：(3～7)mL：(0.2～0.5)g。

10.采用权利要求1～9中任一项所述的方法制备得到的牛蒡子亚油酸产品。