[发明专利]目标物和氧化还原双响应适配体传感器及其制备方法和应用以及鱼腥藻毒素的定量检测方法

权利要求书

1.一种用于定量检测鱼腥藻毒素的目标物和氧化还原双响应适配体传感器的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

(1)将AgNPs@Ru-MOF材料分散在去离子水中制备成AgNPs@Ru-MOF溶液，并将其与DNAS1溶液混合孵育，得到S1-AgNPs@Ru-MOF溶液；

所述DNA S1的基因序列为：

(2)GCE电极抛光处理后，在脱落酸溶液中进行电化学沉积反应得到羧基修饰的ABA/GCE，再将置于EDC和NHS的混合溶液中活化，得到预处理后的GCE电极；

(3)将所述预处理后的GCE电极在所述S1-AgNPs@Ru-MOF溶液混合孵育，洗涤后干燥得到S1-AgNPs@Ru-MOF/GCE电极；

(4)将所述S1-AgNPs@Ru-MOF/GCE电极在DNA S3溶液中进行孵育，洗涤后干燥得到S3/S1-AgNPs@Ru-MOF/GCE电极；

所述DNA S3的基因序列为：

5’-GCTCACTATACGCTGCCCCGTTAACGCCTAA-TGGCGACAAGAAGA CGTACAAACACGCACCAGGCCGGAGTGGAGTATTCTGAGGTCGG-3’；

(5)将DNA S2溶液与二茂铁甲酸溶液及EDC、NHS溶液混合孵育，得到S2-Fc溶液；

所述DNA S2的基因序列为：

(6)将所述S3/S1-AgNPs@Ru-MOF/GCE电极浸润在S2-Fc溶液中，混合孵育，洗涤后晾干，即可得到所述目标物和氧化还原双响应适配体传感器；

所述DNA S1溶液、DNA S2溶液、DNA S3溶液是分别将DNA S1、DNA S2、DNA S3溶解在PH＝7.4的10mM Tris-HCl缓冲溶液中得到，三者的浓度均为1μM。

2.根据权利要求1所述的用于定量检测鱼腥藻毒素的目标物和氧化还原双响应适配体传感器的制备方法，其特征在于，所述孵育的温度均为35～38℃；所述步骤(1)、(3)、(4)、(5)、(6)中的孵育时间分别为8～12h、1.5～2.5h、1.5～2.5h、8～12h、1.5～3.0h。

3.根据权利要求1或2所述的用于定量检测鱼腥藻毒素的目标物和氧化还原双响应适配体传感器的制备方法，其特征在于，所述制备方法具体包括以下步骤：

(1)将AgNPs@Ru-MOF材料分散在去离子水中制备成浓度为1mg/mL AgNPs@Ru-MOF溶液，将20μL AgNPs@Ru-MOF溶液与20μL 1μM DNA S1溶液混合孵育8～12h，得到S1-AgNPs@Ru-MOF溶液；

(2)GCE电极抛光处理后，置于含1mM脱落酸溶液中，以银/氯化银为参比电极、铂丝为对电极，以10mV/s扫描电位0.4～1.2V进行电沉积，三次循环后得到羧基修饰的ABA/GCE，再将其置于含等摩尔的EDC、NHS的混合溶液中浸泡2h，得到预处理后的GCE电极；

(3)将预处理后的GCE电极浸润在20μL所述S1-AgNPs@Ru-MOF溶液中1.5～2.5h，洗涤干燥后得到S1-AgNPs@Ru-MOF/GCE电极；

(4)将所述S1-AgNPs@Ru-MOF/GCE电极浸润在10μL 1μM DNA S3溶液中，混合孵育1.5～2.5h，洗涤干燥后得到S3/S1-AgNPs@Ru-MOF/GCE；

(5)将20μL 1μM DNA S2溶液与100μL 1μM二茂铁甲酸溶液、8μL 5mM EDC、8μL 5mM NHS混合孵育8～12h，得到S2-Fc溶液；

(6)将所述S3/S1-AgNPs@Ru-MOF/GCE电极浸润在10μL所述S2-Fc溶液中，混合孵育1.5～3.0h，洗涤干燥后即可得到所述目标物和氧化还原双响应适配体传感器。

4.如权利要求1-3任意一项所述的制备方法制备得到的用于定量检测鱼腥藻毒素的目标物和氧化还原双响应适配体传感器。

5.如权利要求4所述的用于定量检测鱼腥藻毒素的目标物和氧化还原双响应适配体传感器在定量检测鱼腥藻毒素中的应用。