[发明专利]与鸡血清碱性磷酸酶水平相关的分子标记、检测引物、试剂盒及应用

权利要求书

1.与鸡血清碱性磷酸酶水平相关的分子标记，其特征在于，所述分子标记包括SNP分子标记1、SNP分子标记2、SNP分子标记3和SNP分子标记4四个完全连锁的多态性分子标记，构成G-C-A-C和A-T-G-A两种单倍型；

所述SNP分子标记1的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其5’端起第139位碱基，多态性为G或A；

所述SNP分子标记2的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其5’端起第201位碱基，多态性为C或T；

所述SNP分子标记3的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其5’端起第289位碱基，多态性为A或G；

所述SNP分子标记4的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其5’端起第315位碱基，多态性为C或A。

2.权利要求1所述的分子标记或其中的至少一个SNP分子标记的应用，所述应用为非疾病诊断目的，为以下任一所示：

1）在评价鸡血清碱性磷酸酶水平方面的应用；

2）在鸡血清碱性磷酸酶水平分子辅助选择育种方面的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，选择SNP分子标记1作为标签SNP分子标记，对SNP分子标记1的基因型进行检测，当待测鸡的基因型为GG时，待测鸡为低水平血清ALP个体，当待测鸡的基因型为AA时，待测鸡为高水平血清ALP个体。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，排除GG基因型的鸡个体。

5.用于检测权利要求1所述分子标记的基因型的引物的应用，所述应用为非疾病诊断目的，为以下任一所示，1）在评价鸡血清碱性磷酸酶水平方面的应用，2）在鸡血清碱性磷酸酶水平分子辅助选择育种方面的应用，其特征在于，所述引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示。

6.用于检测权利要求1所述分子标记的基因型的试剂盒的应用，所述应用为非疾病诊断目的，为以下任一所示，1）在评价鸡血清碱性磷酸酶水平方面的应用，2）在鸡血清碱性磷酸酶水平分子辅助选择育种方面的应用，其特征在于，所述试剂盒包含核苷酸序列如SEQID NO:2和SEQ ID NO:3所示的引物，以及Hinfl内切酶。

7.评价鸡血清碱性磷酸酶水平的方法，所述方法为非疾病诊断目的，其特征在于，包括如下步骤：检测如权利要求1所述的分子标记或其中的至少一个SNP分子标记的基因型。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，采用核苷酸序列如SEQ ID NO:2和SEQ IDNO:3所示的引物，以待测鸡基因组DNA为模板进行PCR扩增，对PCR产物用Hinfl内切酶进行酶切，若酶切产物为589 bp，突变处碱基为纯合GG型，若酶切产物为451/138 bp，则突变处碱基为纯合AA型，若酶切产物为589/451/138 bp，则突变处碱基为杂合GA型；当待测鸡的基因型为GG时，待测鸡为低水平血清ALP个体，当待测鸡的基因型为AA时，待测鸡为高水平血清ALP个体。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，PCR的反应程序为：95℃ 5min；95℃ 15s，63℃ 15s，72℃ 10s，共35个循环；72℃ 5min。