[发明专利]一种叶子鱼小肽的发酵酶解制备方法及其应用

说明书

本发明公开了一种叶子鱼小肽的发酵酶解制备方法，过程包括：将叶子鱼粉碎、脱脂、水解，得水解液；以复合酶对水解液进行酶解，得到酶解液；用微生物对酶解液发酵，得发酵液；对发酵液过滤，收集上清，获得粗肽液；然后对所剩杂质，重复酶解、发酵和过滤的过程，再次得到粗肽液；用G‑15葡聚糖凝胶柱对两次所得粗肽液纯化，再用凝胶色谱分离得到含有氨基酸片段为天冬氨酸‑精氨酸‑组氨酸‑赖氨酸的小肽液将所得小肽液干燥并除潮，得叶子鱼小肽；该发明提供的方法改善了小肽苦味及易潮的问题，同时所得小肽用于保育猪饲料中，改善了保育猪肠道发育和生长性能，缓解了夏季热应激和冬季冷应激，提高了养殖效益，为养猪生产提供了优质蛋白源。

技术领域

本发明涉及小肽制备技术领域，更具体地说是涉及一种叶子鱼小肽的发酵酶解制备方法及其应用。

背景技术

蛋白质是生命活动的基础物质之一，其在动物营养中的作用不可替代。血浆蛋白粉由于其蛋白组成质量高、易吸收等优点长期被作为优质蛋白源应用于养猪生产，尤其是保育猪生产者中。但由于血浆蛋白粉来源于动物血液含有细胞病毒等有害物质，存在一定的安全隐患，因而已被禁用。鱼类蛋白质被认为是血浆蛋白粉最有竞争力的替代品，开发鱼类蛋白质并通过预处理提高其生物利用率具有显著的行业应用前景和市场价值。

国内外研究表明动物肠道能够完整转运小肽，且哺乳动物对肽中氨基酸残基的吸收速度大于对游离氨基酸的吸收速度，小肽能够消除游离氨基酸的吸收竞争，促进蛋白质的合成，促进动物对矿物质元素的吸收和利用，如动物源小肽能使亚铁离子可溶性、吸收率提高。

申请号为201910433981.1和201910439376.5的专利提出了从银杏和芒果籽中提取肽的技术，这样提取的为植物性蛋白，在养猪生产中应用效果差于动物蛋白；申请号为202010957453.9的专利所提出从海洋鱼中提取肽，但不同类鱼所需条件不同，单一制备方法多有蛋白浪费的情况。

因此，如何提供一种提取小肽的制备方法并将其应用于养殖业中是本领域技术人员亟需解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提出了从叶子鱼中提取小肽的方法，该方法改善了所得小肽苦味及易潮的问题，同时将小肽用于保育猪饲料中，改善了保育猪肠道发育和生长性能，缓解了夏季热应激和冬季冷应激，提高了养殖效益，为养猪生产提供优质蛋白源。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种叶子鱼小肽的发酵酶解制备方法，包括以下步骤：

(1)预处理：将叶子鱼粉碎、脱脂、水解，得水解液；

(2)酶解：以复合酶对步骤1)所得水解液进行酶解，得到酶解液；

(3)发酵：用微生物对步骤2)所得酶解液进行发酵，得发酵液；

(4)过滤二次处理：对步骤3)所得发酵液进行过滤，收集上清，获得小肽液；然后收集杂质，重复步骤(2)和(3)的过程，得到发酵液，过滤，得粗肽液；

(5)纯化分离：用G-15葡聚糖凝胶柱对步骤4)所得粗肽粗肽液纯化，再用凝胶色谱分离得到含有氨基酸片段为天冬氨酸-精氨酸-组氨酸-赖氨酸的小肽液；

(6)制备：将步骤(5)所得小肽液干燥并除潮，得叶子鱼小肽。

以上技术方案达到的技术效果是：叶子鱼是海洋中常见鱼类，价格低廉，且含有大量优质蛋白，是鱼粉的良好来源。在幼龄动物中，如猪等由于其肠道发育不完全，消化系统不完善，对蛋白的利用不彻底，因此，本发明将叶子鱼中的蛋白分解为小肽可以更好地被吸收利用。该方法操作简单，无污染，且能充分分解蛋白，适合在养殖业中推广应用。