[发明专利]用单唾液酸四己糖神经节苷脂修饰的脂质体及其制法和冻干应用

权利要求书

1.一种用单唾液酸四己糖神经节苷脂修饰的脂质体，其特征在于，所述的用单唾液酸四己糖神经节苷脂修饰的脂质体，其脂质体膜材包括：磷脂、二硬脂酰磷脂酰甘油、胆固醇、唾液酸衍生物和单唾液酸四己糖神经节苷脂；

所述的唾液酸衍生物为唾液酸-十八胺、唾液酸-胆固醇、唾液酸-脂肪酸衍生物中的一种；唾液酸衍生物占脂质体膜材的摩尔百分比为：5~10mol%；

所述的单唾液酸四己糖神经节苷脂占脂质体膜材的摩尔百分比为0.5~20mol%。

2.根据权利要求1所述的用单唾液酸四己糖神经节苷脂修饰的脂质体，其特征在于，所述的单唾液酸四己糖神经节苷脂占脂质体膜材的摩尔百分比为1~10mol%。

3.根据权利要求1所述的用单唾液酸四己糖神经节苷脂修饰的脂质体，其特征在于，按摩尔比，磷脂：二硬脂酰磷脂酰甘油：胆固醇=(35~70)：20：10。

4.根据权利要求1所述的用单唾液酸四己糖神经节苷脂修饰的脂质体，其特征在于，所述的磷脂为天然磷脂、半合成磷脂、合成磷脂中的一种或几种；

所述的天然磷脂选用天然甘油磷脂和/或天然鞘磷脂，甘油磷脂选用大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺、心肌磷脂、磷脂酰肌醇中的一种或几种；

所述的半合成磷脂选用氢化大豆卵磷脂和/或氢化蛋黄卵磷脂；

所述的合成磷脂选用合成甘油磷脂和/或合成鞘磷脂，其中，甘油磷脂包括二硬脂酰磷脂酰胆碱，二棕榈酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、二月桂酰磷脂酰胆碱、二癸酰磷脂酰胆碱、二辛酰磷脂酰胆碱、二己酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰甘油及其盐，二棕榈酰磷脂酰甘油及其盐，L-α-二肉豆蔻酰磷脂酰甘油及其盐，二月桂酰磷脂酰甘油、二癸酰磷脂酰甘油、二辛酰磷脂酰甘油、二己酰磷脂酰甘油、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺，二棕榈酰磷脂酰乙醇胺、二油酰磷脂酰乙醇胺，二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺、二月桂酰磷脂酰乙醇胺、双二硬脂酰磷脂酰甘油及其盐、双二棕榈酰磷脂酰甘油及其盐、双二肉豆蔻酰磷脂酰甘油及其盐、双二月桂酰磷脂酰甘油、二硬脂酰磷脂酰肌醇、二棕榈酰磷脂酰肌醇、二油酰磷脂酰肌醇、二肉豆蔻酰磷脂酰肌醇、二月桂酰磷脂酰肌醇、棕榈酰油酰磷脂酰胆碱、棕榈酰亚油酰磷脂酰胆碱、硬脂酰亚油酰磷脂酰胆碱、硬脂酰油酰磷脂酰胆碱、硬脂酰花生四烯酰磷脂酰胆碱中的一种或几种。

5.权利要求1所述的用单唾液酸四己糖神经节苷脂修饰的脂质体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)按配比，称量脂质体膜材，加入无水乙醇混合，并溶解，得到膜材乙醇溶液；其中，无水乙醇体积占用单唾液酸四己糖神经节苷脂修饰的脂质体混悬液体积百分比为5~10%；

将膜材乙醇溶液以1~5 mL·min^-1的速度加入至柠檬酸-柠檬酸钠溶液中，在55~70℃搅拌孵育10~30min，得到空白脂质体初品；按体积比，膜材乙醇溶液：柠檬酸-柠檬酸钠溶液=1：(10~20)；

(2)在55~70℃，将空白脂质体初品经过不同规格过滤膜挤出，得到用单唾液酸四己糖神经节苷脂修饰的脂质体混悬液。

6.权利要求1所述的用单唾液酸四己糖神经节苷脂修饰的脂质体的冻干应用，其特征在于，将用单唾液酸四己糖神经节苷脂修饰的脂质体用于作为药物载体，装载抗肿瘤药物、抗菌素、麻醉药物、激素类药物中的一种，并采用冷冻干燥法提高脂质体的贮存稳定性；

所述的抗肿瘤药物为多柔比星、表柔比星、米托蒽醌、伊立替康、匹杉琼、米铂中的一种或几种。

7.根据权利要求6所述的用单唾液酸四己糖神经节苷脂修饰的脂质体的冻干应用，其特征在于，包括以下过程：

步骤1：梯度空白脂质体的制备与药物的装载

采用pH调节剂调节用单唾液酸四己糖神经节苷脂修饰的脂质体混悬液中外水相pH为7.0，按质量比，药物：脂质体=1:(20~5)，加入药物，在55~65℃孵育15~30min进行装载，置于0℃中2min终止载药，得到载药后的脂质体混悬液；

步骤2：冷冻干燥

将载药后的脂质体混悬液和冻干保护剂溶液混合，置于西林瓶中，按质量体积比，冻干保护剂：载药后的脂质体混悬液+冻干保护剂溶液总体积=1g:(6~10)mL；

将西林瓶置于冻干机板层上，采用慢冻，在真空度为0Pa进行预冻，预冻温度为-50℃，预冻时间为6~8h，在真空度为4~15Pa，以间隔5~20℃梯度升温，并每个温度维持2~16h，并且分段进行一次干燥，并且，在升温至25~30℃进行二次干燥，二次干燥时间为5~10h；得到冻干脂质体；

步骤3：重构

室温下，用灭菌注射用水重构冻干脂质体，得到载药的冻干脂质体；

所述的载药的冻干脂质体，其粒径PDI0.1，冷冻干燥前后的粒径变化10nm，包封率≥90%，重构后的脂质体为圆形或类圆形囊泡，双分子层明显；冻干前后脂质体的体外释放行为无明显差异。