[发明专利]一种稳定、灵敏的髓过氧化物酶检测试剂盒

权利要求书

1.一种稳定、灵敏的髓过氧化物酶检测试剂盒，其特征在于，包括试剂R1和试剂R2，所述试剂R1的成分和含量为：

缓冲液 56-95mmol/L，

氯化锂 22~32g/L，

D-艾杜糖 0.5~1.5g/L，

赤藓糖醇 10~25g/L，

PEG-10000 8.5~20.5g/L，

三异丙醇胺聚氧丙烯聚氧乙烯醚 0.2~0.7g/L，

防腐剂 0.5-1.2g/L；

所述试剂R2的成分和含量为：

缓冲液 33-65mmol/L，

D-艾杜糖 0.5~1.5g/L，

赤藓糖醇 10~25g/L，

三异丙醇胺聚氧丙烯聚氧乙烯醚 0.22~0.65g/L，

羧基化三氧化二铁磁性纳米颗粒 0.12~0.24g/L

83nm的兔抗人髓过氧化物酶抗体包被胶乳颗粒 0.35%~0.66%，

185nm的兔抗人髓过氧化物酶抗体包被胶乳颗粒 0.12%~0.38%，

防腐剂 0.5-1.2g/L。

2.根据权利要求1所述的髓过氧化物酶检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1、R2的缓冲液为25℃、pH为6-8的DIPSO缓冲液。

3.根据权利要求1所述的髓过氧化物酶检测试剂盒，其特征在于，所述防腐剂为o-邻伞花烃-5-醇。

4.根据权利要求1所述的髓过氧化物酶检测试剂盒，其特征在于，所述兔抗人髓过氧化物酶抗体包被胶乳颗粒的制备步骤如下：

步骤1：各取1mg粒径为83nm的羧基胶乳颗粒和185nm的羧基胶乳颗粒，分别加入MOPS-HCL缓冲液，振荡混匀，然后离心，弃上清，再分别加入 MOPS-HCL缓冲液超声重悬，得到83nm羧基胶乳颗粒缓冲体系和185nm羧基胶乳颗粒缓冲体系；

步骤2：于步骤1得到的83nm羧基胶乳颗粒缓冲体系和185nm羧基胶乳颗粒缓冲体系中分别加入 EDC 和NHS，并补充MOPS-HCL缓冲液至5mL，于32℃温度及转速下振荡反应25min，进行活化；

步骤3：活化结束后，离心，去上清，分别加入MOPS-HCL缓冲液进行超声重悬，重复一次，之后加入PIPES超声重悬，待用；

步骤4：在步骤3所得液体中分别加入髓过氧化物酶抗体，混匀，于恒温振荡箱反应；

步骤5：反应结束后，加入 BSA，于2-8℃封闭12h；

步骤6：离心，弃上清，所得沉淀即为83nm兔抗人髓过氧化物酶抗体包被胶乳颗粒和185nm兔抗人髓过氧化物酶抗体包被胶乳颗粒。

5.根据权利要求4所述的髓过氧化物酶检测试剂盒，其特征在于，粒径为83nm的羧基胶乳颗粒对应的离心转速为20000rpm，时间45min；粒径为185nm的羧基胶乳颗粒对应的离心转速为12000rpm，时间45min。

6.根据权利要求1所述的髓过氧化物酶检测试剂盒，其特征在于，该试剂盒使用全自动生化分析仪利用终点法进行测定，检测主波长为570nm，R1试剂和R2试剂的比例为4:1。