[发明专利]一种用于乙肝病毒抗体体外诊断的试剂及方法

说明书

本发明公开了一种用于乙肝病毒抗体体外诊断的试剂，所述试剂包括固相抗原、酶标抗原和显色底物，固相抗原包括固相载体和包被在固相载体表面的抗原，酶标抗原包括用来标记抗原的酶和被酶标记的抗原，所述抗原为乙肝抗原重组蛋白，所述固相抗原和酶标抗原中的抗原为同一种乙肝抗原重组蛋白，所述固相载体包括磁性微球，所述酶包括辣根过氧化物酶，所述显色底物包括TMB。本发明还公开制备上述试剂的方法以及使用上述试剂识别乙肝病毒抗体的方法。本发明的试剂用于检测乙肝病毒抗体，具有特异性好、灵敏度高、结果准确、重复性好、临床适用性强，可以较准确地反映出人体内乙肝病毒抗体的含量指标。

技术领域

本发明涉及免疫医学分析领域，具体地，本发明涉及一种用于乙肝病毒抗体体外诊断的试剂及方法。

背景技术

目前，实验室检测血清中乙肝抗体的方法主要有酶联免疫吸附测定(ELISA)、化学发光定量和金标法等，其中化学发光法是检测乙肝抗体较为准确的方法，但价格昂贵，难以普遍推广。因为ELISA的敏感性、特异性比较高而成本较低，现在多数医院采用ELISA法检测乙肝抗体。但是传统ELISA方法存在重复性差、测定结果不准确的问题。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于乙肝病毒抗体体外诊断的试剂及方法，可用于乙肝病毒抗体的检测，该检测方法特异性好、灵敏度高、结果准确、重复性好、临床适用性强，可以较准确地反映出人体内乙肝病毒抗体的含量指标。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

一种用于乙肝病毒抗体体外诊断的试剂，包括以下组分：

固相抗原，包括固相载体和包被在固相载体表面的抗原；

酶标抗原，包括用来标记抗原的酶和被酶标记的抗原；

显色底物；

所述抗原为乙肝抗原重组蛋白；

所述固相载体包括磁性微球；

所述酶包括辣根过氧化物酶；

所述显色底物包括TMB(3,3,5,5,-四甲基联苯胺)；优选地，所述TMB为3,3,5,5,-四甲基联苯胺盐酸盐。

优选地，所述包被在固相载体表面的抗原和被酶标记的抗原为同一种乙肝抗原重组蛋白。

优选地，所述乙肝抗原重组蛋白至少包括乙肝表面抗原重组蛋白。

乙肝表面抗原重组蛋白的制备方法参考发明专利：CN105734066B，一种含有重组乙肝病毒基因的真核汉逊酵母工程菌的构建及乙肝表面抗原的生产方法。

当选用的乙肝抗原重组蛋白为乙肝表面抗原重组蛋白时，可用来测定样本中乙肝病毒表面抗体HBsAb的含量。乙肝病毒表面抗体HBsAb是机体唯一对乙肝病毒HBv感染有保护作用的抗体，其含量越高，机体抵抗HBV入侵的能力越强，通过测定样本中乙肝病毒表面抗体HBsAb的含量，可以判断机体对HBV的免疫力。

优选地，所述磁性微球包括磁性粒子内核及包裹在外的外壳；

优选地，所述磁性粒子内核包括Fe₃O₄纳米磁性粒子、γ–Fe₂O₃纳米磁性粒子中的任意一种；

优选地，所述外壳的材质包括聚苯乙烯、聚丙烯酸、聚丙烯酰胺、聚乙烯醇中的任意一种。

优选地，制备用于乙肝病毒抗体体外诊断的试剂的方法，包括如下步骤：

(1)固相抗原的制备：将抗原包被于固相载体表面；

(2)酶标抗原的制备：使用酶对抗原进行标记；

(3)显色底物的配制；