[发明专利]一种D-A-D型FRET DNA纳米机器及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 202110631259.6 | 申请日： | 2021-06-07 |
| 公开（公告）号： | CN113388666B | 公开（公告）日： | 2022-07-29 |
| 发明（设计）人： | 何鹏;韩文豪;隋永鹍;李甜甜;宋维玲;张晓茹;李东祥 | 申请（专利权）人： | 青岛科技大学 |
| 主分类号： | C12Q1/682 | 分类号： | C12Q1/682 |
| 代理公司： | 济南舜源专利事务所有限公司 37205 | 代理人： | 侯绪军 |
| 地址： | 266042 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 fret dna 纳米 机器 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种D-A-D型FRET DNA纳米机器的制备方法，其特征在于，使用四条退火后的发夹DNA依次修饰DNA四面体，得到D-A-D型FRET DNA纳米机器，四条发夹DNA分别为HMg、H1-FAM、H2-TAMRA和H3-FAM，HMg的序列如SEQ ID No.5所示，H1-FAM的序列如SEQ ID No.6所示，H2-TAMRA的序列如SEQ ID No.7所示，H3-FAM的序列如SEQ ID No.8所示；
包括如下步骤：
（1）使用浓度为20mM，pH值为7.4的Tris-HCl缓冲溶液将四条发夹DNA分别稀释为1μM的分散液，将四种分散液分别置于95℃下加热5min后自然冷却到室温，完成退火处理；
（2）然后退火后的四条发夹DNA依次与DNA四面体比例混合并于37℃下反应，四条发夹DNA与DNA四面体的摩尔比为1：1：1：1：1，DNA四面体中TDNa、TDNb、TDNc、TDNd的浓度均为1µM；
DNA四面体按照如下方法制得：
将四条寡核苷酸长链依次加入到TM缓冲溶液中得到均匀混合物，加热后立即冷却，混合物的加热温度为95℃、加热时间为5min；冷却温度为4℃、冷却时间为30min，得到DNA四面体，四条寡核苷酸长链分别为TDNa、TDNb、TDNc、TDNd，TDNa的序列如SEQ ID No.1所示，TDNb的序列如SEQ ID No.2所示，TDNc的序列如SEQ ID No.3所示，TDNd的序列如SEQ ID No.4所示，TM缓冲溶液中Tris-HCl的浓度为20mM，MgCl2的浓度为50mM，TM缓冲溶液的pH值为8.0。
2.一种采用如权利要求1所述的制备方法制得的D-A-D型FRET DNA纳米机器。
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