[发明专利]一种虎杖苷提取纯化方法

权利要求书

1.一种虎杖苷提取纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：

第一步、将虎杖干燥至恒重，用中药粉碎机制成粉末，过40目筛，得到虎杖粉，存储备用；

第二步、将虎杖粉、纤维素酶和保护剂加入质量分数的35％乙醇溶液中，滴加乙酸溶液，调整体系pH值至为5.5，控制温度60℃，功率65-75W下，进行超声波提取1h，然后过滤，滤液于50-70℃下浓缩得到粗浸膏，避光保存备用；

第三步、将粗浸膏和去离子水混合，搅拌10-20min后利用R型树脂柱纯化，树脂柱先用水洗，然后用洗脱液洗脱杂质，加压解吸，收集解吸后的滤液；

第四步、将解吸后的滤液经过超滤膜纯化后，浓缩至1/3体积，冷冻干燥，避光条件下，温度2-25℃保存，得到虎杖苷；

所述保护剂由以下步骤制成：

步骤A1、将正二十二烷、二甲基甲酰胺和十六烷基三甲基溴化铵置于三口烧瓶中，在50℃条件下恒温搅拌2h，然后滴加正硅酸乙酯，滴加结束后继续搅拌5h，滴加盐酸溶液，滴加结束后停止搅拌，于50℃温度下陈化12h后，过滤，洗涤，干燥，得到中间产物1；

步骤A2、将中间产物1、醋酸锌、柠檬酸钠、聚乙二醇和去离子水加入圆底烧瓶中，设置温度40℃，磁力搅拌1h，然后加入乌洛托品，搅拌5min后转移至高压反应釜中，于95℃下恒温反应6-10h，再于80℃的条件下陈化4h，冷却至室温后，过滤，洗涤，干燥，得到中间产物2；

步骤A3、向三口烧瓶中加入中间产物2、无水乙醇和去离子水，频率40-50kHz下超声分散5-8min，加入硅烷偶联剂KH-560，搅拌5min后，升温至40℃反应4-6h，反应结束后，过滤，洗涤，干燥，得到中间产物3；

步骤A4、在温度0℃下，将2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮-5-磺酸和氯磺酸加入圆底烧瓶中，30min内升温至室温，搅拌反应2h，反应结束后，将反应产物加入冰水中，形成沉淀，过滤，洗涤，干燥，得到中间产物4；

步骤A5、将中间产物3和去离子水加入烧瓶中，超声分散，滴加乙二胺，搅拌反应1-2h，向烧瓶中加入中间产物4和氢氧化钠，搅拌反应30-50min，反应结束后，过滤，洗涤，干燥，得到保护剂。

2.根据权利要求1所述的一种虎杖苷提取纯化方法，其特征在于，第二步中虎杖粉、纤维素酶、保护剂和乙醇溶液的用量比为3-5kg：0.25kg：0.5kg：100-120L。

3.根据权利要求1所述的一种虎杖苷提取纯化方法，其特征在于，第三步中粗浸膏和去离子水的用量比为1kg：10L，R型树脂为Chroma-R204树脂，目数为100-120目，洗脱液为质量浓度20-25％的乙醇水溶液、甲醇水溶液和丙酮水溶液中的一种，解吸液为质量分数28-32％的乙醇水溶液、甲醇水溶液和丙酮水溶液中的一种。