[发明专利]一种虎杖苷提取纯化方法

说明书

本发明公开了一种虎杖苷提取纯化方法，属于化合物分离技术领域，包括以下步骤：第一步、制备虎杖粉；第二步、将虎杖粉、纤维素酶和保护剂加入质量分数的35％乙醇溶液中，进行超声波提取1h，然后过滤，滤液于50‑70℃下浓缩得到粗浸膏，避光保存备用；第三步、将粗浸膏和去离子水混合，搅拌10‑20mi n后利用R型树脂柱纯化，树脂柱先用水洗，然后用洗脱液洗脱杂质，加压解吸，收集解吸后的滤液；第四步、将解吸后的滤液经过超滤膜纯化后，浓缩至1/3体积，冷冻干燥，避光条件下，温度2‑25℃保存，得到虎杖苷，本发明所述提取方法得到的虎杖苷得率高，纯度大。

技术领域

本发明属于化合物分离技术领域，具体地，涉及一种虎杖苷提取纯化方法。

背景技术

虎杖是一味传统中药，具有清热解毒、活血化瘀的功效，主要成分包括二苯乙烯类、蒽醌类、黄酮类、酚类等，虎杖苷是白藜芦醇与葡萄糖结合的产物，也称白藜芦醇苷，其药理作用与白藜芦醇类似，两者可在体内转化。

虎杖苷的提取已见于很多报道，主要来源于蓼科植物虎杖的干燥根茎和叶，公开号CN 108440616 A的中国发明专利公开了一种虎杖苷提取分离的方法，该方法以虎杖叶为原料，采用醇提、乙醚脱酯、水溶过滤、树脂柱层析分离等工艺过程，制得含量在70％以上的虎杖苷，分离效果显著，再通过简单的重结晶就可以得到含量98％以上的产品；但是虎杖苷属于二苯烯类化合物，存在顺反异构体，自然情况下以反式异构体存在，但是见光易转化成顺式异构体，造成虎杖苷的纯度不高，温度高于60℃以上二苯乙烯类化合物容易发生水解反应，由苷脱去葡糖糖基水解为苷元，甚至进一步地水解为酚类物质，因此，虎杖苷的提取纯化过程中光照和温度会影响虎杖苷的纯度和活性，因此，提供一种高纯度、高活性的虎杖苷提取纯化方法是目前需要解决的技术问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种虎杖苷提取纯化方法。

本发明需要解决的技术问题为：

现有技术中，虎杖苷提取纯化过程中，温度和光照条件无法准确调控，导致虎杖苷的活性和纯度下降。

本发明的目的可以通过以下技术方案实现：

一种虎杖苷提取纯化方法，包括以下步骤：

第二步、将虎杖粉、纤维素酶和保护剂加入质量分数的35％乙醇溶液中，滴加乙酸溶液，调整体系pH值至为5.5，控制温度60℃，功率65-75W下，进行超声波提取1h，然后过滤，滤液于50-70℃下浓缩得到粗浸膏，避光保存备用；

第三步、将粗浸膏和去离子水混合，搅拌10-20min后利用R型树脂柱纯化，树脂柱先用水洗，然后用洗脱液洗脱杂质，加压解吸，收集解吸后的滤液；

第四步、将解吸后的滤液经过超滤膜纯化后，浓缩至1/3体积，冷冻干燥，避光条件下，温度2-25℃保存，得到虎杖苷。

进一步地，第二步中虎杖粉、纤维素酶、保护剂和乙醇溶液的用量比为3-5kg：0.25kg：0.5kg：100-120L。

进一步地，第三步中粗浸膏和去离子水的用量比为1kg：10L，R型树脂为Chroma-R204树脂，目数为100-120目，洗脱液为质量浓度20-25％的乙醇水溶液、甲醇水溶液和丙酮水溶液中的一种，解吸液为质量分数28-32％的乙醇水溶液、甲醇水溶液和丙酮水溶液中的一种。

进一步地，所述保护剂由以下步骤制成：

步骤A1、将正二十二烷、二甲基甲酰胺和十六烷基三甲基溴化铵置于三口烧瓶中，在50℃条件下恒温搅拌2h，然后滴加正硅酸乙酯，控制滴加速度1-3滴/秒，滴加结束后继续搅拌5h，再通过蠕动泵滴加浓度0.1mol/L的盐酸溶液，2h内滴加结束，滴加结束后停止搅拌，于50℃温度下陈化12h后，过滤，滤饼用质量分数35％的乙醇溶液洗涤3-5次，最后于40℃烘箱中干燥至恒重，将二十二烷用二氧化硅外壳进行微胶囊化，得到中间产物1；