[发明专利]一种苦杏仁提取物的制备方法

说明书

本发明提供一种苦杏仁提取物的制备方法，经S1苦杏仁预处理：将苦杏仁装入沸水中在冷却，S2脱脂处理：将冷却后的苦杏仁进行脱皮后粉碎，再和脱脂剂放置提取器中回流，S3超声提取：将脱脂苦杏仁粉末和甲醇进行超声处理，得到苦杏仁粗提物，S4正相柱层分离：苦杏仁粗提物与填料混合，得到粗提物‑填料拌样，以乙酸乙酯‑甲醇为洗脱剂，再减压蒸馏得到苦杏仁浓缩液，S5高速逆流色谱纯化：以乙酸乙酯、正丁醇、丁二醇作为纯化溶剂体系，经高速逆流色谱分离纯化得到苦杏仁提取物，使获得的苦杏仁苷转移率高达到86.41％，干膏收率高，达到11.47％，D型苦杏仁苷含量10.46mg/g及纯度98.6％。

技术领域

本发明涉及植物提取领域，特别涉及一种苦杏仁提取物的制备方法。

背景技术

苦杏仁苷主要存在于苦杏、苦扁桃、桃、油桃、枇杷、李子、苹果、黑樱桃等果仁和叶子中，苦杏仁苷是一种氰苷类物质，分为D型和L型，前者有药理活性后者却没有。而D型苦杏仁苷在高温下会转变成L型从而失去药理活性，所以常规提取方式有可能会引起D型苦杏仁苷的异构化，而导致失活；目前关于苦杏仁苷的提取主要是煎煮、回流、超声等传统方法，专利“一种从苦杏仁中同时提取多种有效成分的方法”，CN102994222B，同时提取多种有效成分，而苦杏仁苷的含量较低，纯度较低，“一种苦杏仁苷的制备方法”，CN105461765B，其对D型和L型的苦杏仁苷分离方法中，得到的D型苦杏仁苷含量较低。

发明内容

鉴于此，本发明提出一种苦杏仁提取物的制备方法，解决上述问题。

本发明的技术方案是这样实现的：一种苦杏仁提取物的制备方法：包括以下步骤：

S1、苦杏仁预处理：将苦杏仁装入沸水中，煮3～8min，取出，放入冷水中冷却，得到冷却苦杏仁；在冷水中冷却有效去除苦杏仁中的氢氰酸，防止在提取时收到干扰；

S2、脱脂处理：将冷却后的苦杏仁进行脱皮后，粉碎至100～200目，得到苦杏仁粉末，按照质量体积比g/mL为1～5:28的苦杏仁粉末和脱脂剂放置提取器中于70～100℃回流2～8h，过滤，取出滤渣，于-25～-16℃下储藏，得到脱脂苦杏仁粉末；脱脂处理防止之后的超声破碎作用增大，避免细胞内大量不容物、淀粉颗粒及黏液质等混入提取液中，避免D型苦杏仁苷异构化，利于D型苦杏仁苷的提取；

S3、超声提取：取S2得到的脱脂苦杏仁粉末和甲醇进行超声处理20～60min，放冷，再加入甲醇再超声提取10～40min，经微孔滤膜过滤，得到滤液，即苦杏仁粗提物；超声时间10～40min，超声破碎作用适中，细胞内苦杏仁苷释放充分，使D型苦杏仁苷得率达到最大值；

S4、正相柱层分离：将苦杏仁粗提物与填料按质量比1～8:0.3～2.5的比例混合，得到粗提物-填料拌样，再将粗提物-填料拌样进行大孔树脂柱层析，以乙酸乙酯-甲醇为洗脱剂，收集含有苦杏仁苷的洗脱溶剂，减压蒸馏得到苦杏仁浓缩液；

S5、高速逆流色谱纯化：配制纯化溶剂体系，震荡使溶液充分混合，放置2～5h，分相平衡后分出上相和下相，下相为固定相，上相为流动相，调整转速，将S4得到的苦杏仁浓缩液泵入流动相，减压回收含有苦杏仁苷的流份，干燥得到苦杏仁提取物。

进一步的，所述S1中的冷水温度为-10～-5℃。

进一步的，所述S2中脱脂剂由体积比为1～3:1～5:2～9的石油醚、甜扁桃油、香柑内酯混合制得，使用甜扁桃油和香柑内酯与石油醚混合，协同提高石油醚溶解脂肪的效率，而限定石油醚、甜扁桃油、香柑内酯的比例，使得脱脂剂达到更高效的溶脂效果。

进一步的，所述S3中超声条件为频率10～30kHz、强度0.7～0.9w/cm²。

进一步的，所述S3中苦杏仁粉末和甲醇的质量体积比g/mL为1～5:20。

进一步的，所述S4中乙酸乙酯-甲醇的体积比为40～80:10～30。