[发明专利]一种提高有效成分含量的杜仲悬浮细胞培养方法

权利要求书

1.一种提高有效成分含量的杜仲悬浮细胞培养方法，其特征是，包括如下步骤，

1)将杜仲无菌苗的幼茎或幼叶接种于培养基中培养，诱导得到杜仲愈伤组织，所述培养基中添加有植物生长调节剂；

2)将杜仲愈伤组织接种于培养基中培养，得到杜仲悬浮细胞，所述培养基中添加有植物生长调节剂；

3)在杜仲悬浮细胞中加入真菌多糖和茉莉酸甲酯的混合物，继续培养，得到提高有效成分含量的杜仲悬浮细胞；

真菌多糖的添加量为30-50mg/L且茉莉酸甲酯的添加量为80-120μM/L；

所述真菌多糖的制备方法为，将葡萄座腔菌Botryosphaeria dothidea进行发酵培养，收集菌丝体，干燥，得菌丝体干燥物；加水回流提取，过滤，滤液和乙醇混合，静置，过滤，沉淀加水溶解后，洗脱蛋白，离心，收集上层溶液，冷冻干燥后得到真菌多糖。

2.如权利要求1所述的培养方法，其特征是，步骤1)和步骤2)的培养基为B5培养基。

3.如权利要求1所述的培养方法，其特征是，植物生长调节剂为6-BA，以及NAA或2,4-D的混合物。

4.如权利要求1所述的培养方法，其特征是，植物生长调节剂为6-BA和NAA的混合物。

5.如权利要求3或4所述的培养方法，其特征是，6-BA的添加量为0.8-1.2mg/L，NAA的添加量为0.8-1.2mg/L，2,4-D的添加量为0.5mg/L。