[发明专利]基于Fe3+

权利要求书

1.一种基于Fe³⁺猝灭上转换荧光的金黄色葡萄球菌快速检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

将介孔二氧化硅上转换纳米材料溶液与Fe²⁺溶液混合，然后加入金黄色葡萄球菌适配体，构建检测体系；

利用不同浓度的金黄色葡萄球菌构建标准液，利用所述检测体系测定不同浓度的金黄色葡萄球菌的荧光强度，绘制标准曲线；

所述检测体系中，加入过氧化氢，使得Fe²⁺氧化成Fe³⁺导致上转换荧光淬灭，然后测定待测样品中荧光淬灭程度，利用所述标准曲线获取待测样品中金黄色葡萄球菌的含量；

所述检测体系的构建具体包括以下步骤：

步骤1：利用高温热分解法制备上转换纳米材料，再将介孔二氧化硅包覆于所述上转换纳米材料表面，得到介孔二氧化硅上转换纳米材料；

步骤2：所述介孔二氧化硅上转换纳米材料分散于磷酸盐缓冲液中，再与过量的氯化亚铁混合，之后加入金黄色葡萄球菌适配体混匀孵育，离心、清洗，得到包覆适配体上转换纳米材料；

所述介孔二氧化硅上转换纳米材料的制备包括以下步骤：将油溶性上转换纳米颗粒与十六烷基三甲基溴化铵反应，得到混合溶液，并向混合溶液中加入蒸馏水、乙醇和氨水搅拌反应，再加入正硅酸四乙酯，封闭搅拌反应，冷却、清洗得到介孔二氧化硅上转换纳米材料；

所述油溶性上转换纳米颗粒采用高温热分解法制备，包括以下步骤：将六水合物氯化钇、六水合物氯化镱和六水合物氯化铒溶于甲醇中，并将其与油酸和1-十八烯反应，再将所得反应溶液在氩气下加热形成透明溶液后，将溶解有氢氧化钠和氟化铵的甲醇混合液逐滴滴加到所述透明溶液中，形成白色悬浊液，然后在封闭条件下，加热去除多余甲醇，冷却，离心得到白色固体沉淀即为油溶性上转换纳米颗粒。

2.根据权利要求1所述的基于Fe³⁺猝灭上转换荧光的金黄色葡萄球菌快速检测方法，其特征在于，步骤2中所述介孔二氧化硅上转换纳米材料与所述金黄色葡萄球菌适配体的体积比为125：(1-4)。

3.根据权利要求1所述的基于Fe³⁺猝灭上转换荧光的金黄色葡萄球菌快速检测方法，其特征在于，所述介孔二氧化硅上转换纳米材料浓度为1-3mg/mL，所述金黄色葡萄球菌适配体浓度为45-55μmol/L。

4.根据权利要求1所述的基于Fe³⁺猝灭上转换荧光的金黄色葡萄球菌快速检测方法，其特征在于，步骤2中孵育时间为5-30min。

5.根据权利要求1-4任一项所述的基于Fe³⁺猝灭上转换荧光的金黄色葡萄球菌快速检测方法在检测食品中金黄色葡萄球菌水平中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述食品包括鲜肉和牛奶。