[发明专利]一株海洋放线菌及其应用

权利要求书

1. 一种利用海洋放线菌提取抗肿瘤活性物质的方法，其特征在于，所述海洋放线菌为变异链霉菌（streptomyces variabilis）HN42，于2021年1月25日于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号: CGMCC No. 21736；所述肿瘤为宫颈癌；

包括以下步骤：

a 将海洋放线菌HN42接种于液体豆饼粉培养基，摇床培养，得到种子液；

b 将步骤（1）中的种子液接种于豆饼粉固体培养基中，培养7天，将培养基切成碎块用提取液进行提取；

c 将步骤（2）收集的提取物采用乙酸乙酯相与ddH₂O萃取至水相无色，得到乙酸乙酯相，萃取后将乙酸乙酯相旋蒸后溶95%甲醇用石油醚进行萃取，萃取后甲醇相旋蒸得到抗肿瘤活性物质；

步骤（a）中，所述海洋放线菌HN42在液体豆饼粉培养基中的接种量为8%；所述液体豆饼粉培养基配方为：可溶性淀粉4g，豆饼粉25g，葡萄糖5g，酵母膏5g，MgSO₄·7H₂O 0.5g，K₂HPO₄·3 H₂O 0.5g，CaCO₃1g，天然海水1L，pH7.2-7.4；所述摇床培养为28℃、180 r/min摇床培养2天；

步骤（b）中，所述种子液的接种量为8%；所述豆饼粉固体培养基配方为：可溶性淀粉4g，豆饼粉25g，葡萄糖5g，酵母膏5g，MgSO₄·7H₂O 0.5g，K₂HPO₄·3H₂O 0.5g，CaCO₃1g，琼脂20g,天然海水1L，pH7.2-7.4；所述培养为28℃培养7天；

步骤（c）中，所述乙酸乙酯相为乙酸乙酯：甲醇：冰乙酸=80：15：5。