[发明专利]一种间充质干细胞无血清培养基在审
申请号: | 202110638431.0 | 申请日: | 2021-06-08 |
公开(公告)号: | CN113403271A | 公开(公告)日: | 2021-09-17 |
发明(设计)人: | 马旭;郭昌龙;高建恩 | 申请(专利权)人: | 国家卫生健康委科学技术研究所 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775;C12N5/074;A61K35/28;A61K35/12;A61P17/02;A61P37/02 |
代理公司: | 北京市万慧达律师事务所 11111 | 代理人: | 谢敏楠;万丽 |
地址: | 100081 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 间充质 干细胞 血清 培养基 | ||
1.一种无血清培养基,其特征在于,包括基础培养基和添加成分,所述添加成分包括JNK通路抑制剂、ERK1/2通路抑制剂、P38 MAPK通路抑制剂和氨基乙醇,所述的JNK通路抑制剂包括SP600125,ERK1/2通路抑制剂包括PD0325901,P38 MAPK通路抑制剂包括SB202190、SB203580和BIRB796中的至少一种。
2.如权利要求1所述的培养基,其特征在于,所述基础培养基包括DMEM/F12、a-MEM、DMEM或IMDM;
优选地,所述SP600125、PD0325901、P38 MAPK通路抑制剂和氨基乙醇的浓度分别为1-10uM,1-10uM,1-10uM和0-10mg/L;
优选地,所述SP600125、PD0325901、P38 MAPK通路抑制剂和氨基乙醇的浓度分别为1-5uM、1-5uM、1-5uM和0-5mg/L;
优选地,所述P38 MAPK通路抑制剂为1-5uM的SB202190;
优选地,所述P38 MAPK通路抑制剂为1-10uM的SB203580;
优选地,所述P38 MAPK通路抑制剂为1-2uM的BIRB796。
3.如权利要求1所述的培养基,其特征在于,所述添加成分还包括L-谷氨酰胺、碳酸氢钠、hepes、胰岛素、转铁蛋白、白蛋白、聚乙烯醇、2-巯基乙醇、脂质、氨基酸、维生素、微量元素、pluronic F-68、氢化可的松、维生素、粘结胺、黄体酮、腐胺、肝素、EGF、b-FGF、PDGF-BB、IGF-1、GM-CSF、TGF-β1和r-hGH、地塞米松、NEAA、亚硒酸钠、gama-氨基丁酸、胶原蛋白、乙醇胺、雌二醇、还原型谷胱甘肽、5-羟色胺、亚油酸、卵磷脂、丙酮酸钠、甲状腺素;
优选地,所述添加成分包括L-谷氨酰胺1-5mM、碳酸氢钠2~5g/L、hepes 1-5mM、胰岛素1-10mg/L、转铁蛋白5-20mg/L、白蛋白1-5g/L、聚乙烯醇0-1w/v%、2-巯基乙醇50-60nM、脂质0.1-1mg/L、氨基酸1-10g/L、微量元素1-5mg/L、pluronic F-68 100-500mg/L、氢化可的松1-50mg/L、维生素1-80mg/L、粘结胺1-5mg/L、黄体酮10-20mg/L、腐胺1-10mg/L、肝素1-10IU/mL、EGF 1-10mg/L、b-FGF 1-10mg/L、PDGF-BB 1-10mg/L、IGF-1 1-10mg/L、GM-CSF 1-10mg/L、TGF-β1 1-10mg/L和r-hGH 2~4ug/L、地塞米松2-50nM、NEAA 0-500mg/L、亚硒酸钠1-50mg/L、γ-氨基丁酸0-100mg/L、胶原蛋白0.1-50mg/L、乙醇胺20-50nM、雌二醇1-5mg/L、还原型谷胱甘肽2.5-5mg/L、5-羟色胺20~35ug/L、亚油酸2.5-5ug/L、油酸1~3ug/L、卵磷脂1-3ug/L、丙酮酸钠100~200mg/L、甲状腺素80~90nmol/L。
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