[发明专利]蓝莓品种特异性分子标记位点及其筛选方法和应用

权利要求书

1.能够准确鉴定37种蓝莓品种包括Berkeley、Biloxi、Bluecrop、Bluegold、Blueray、Brigitta、Earliblue、Elliott、Hardyblue、Jersey、Jubilee、Legacy、Misty、O'Neal、Patriot、Reka、Rubel、Sharpblue、Spartan、Summit、Sunshine Blue、Toro、Bluetta、PowderBlue、Pink Lemonade、Sweet Heart、JE、EM、Duke与C2--Duke(为不同来源Duke品种)、Draper、Liberty、US-R-03、US-S-08、US-S-09、L1、L3和普鲁的SNP位点，其特征在于，包括1412个位点，具体位点见表1。

2.利用简化基因组测序技术测序Super-GBS筛选蓝莓品种特异分子标记的方法，其特征在于，包括下列步骤：

(1)利用品种准确的37种蓝莓品种为样品，提取叶片基因组DNA；

(2)按照简化基因组测序技术Super-GBS方法构建文库，文库质检合格后上机测序；

Super-GBS测序文库构建接头及引物序列如下表2

名称	序列(5’-3’)
Common adaptor top	GATCGGTCTCGGCATTCCTGCTGAACCGCTCTTCCGATCT
Common adaptor bot	CGAGATCGGAAGAGCGGGGACTTTAAGC
PstI adaptor top	CACGACGCTCTTCCGATCTAACXXXXXXTGCA
PstI adaptor bot	YYYYYYAGATCGGAAGAGCGTCGTG
Primer1	AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCT
Primer2	CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATCGGTCTCGGCATTCCTGCTGAA

(3)根据每个品种的分型结果，首先剔除所有样品中分型一致的位点，然后筛选每个品种内所有个体分型完全一致、且没有个体缺失的位点，获得SNP位点，利用37种蓝莓品种的标准样品对获得的SNP位点进行过滤筛选，并利用37种蓝莓品种的盲样进行SNP位点的验证，最终获得能够准确鉴定37种蓝莓品种的SNP位点(见表1)。