[发明专利]一种CRGD序列肽修饰壳聚糖负载的PAD4抑制剂及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种CRGD序列肽修饰壳聚糖负载的PAD4抑制剂及其制备方法和应用，属于抗肿瘤药物技术领域。本发明以CRGD序列肽修饰壳聚糖作为药物载体，其中壳聚糖具有具有良好的生物相容性和生物可降解性，CRGD序列肽中的RGD序列肽可以特异性的结合在目标细胞过表达的相应受体上，能够利用肿瘤细胞表面的受体与靶向制剂的配体特异性结合将药物靶向输送至靶区所达到的靶向效果。本发明使用CRGD序列肽修饰壳聚糖来负载PAD4抑制剂，能够增强PAD4抑制剂对目标肿瘤细胞的选择性，减少药物不良反应，使其具有良好的抗肿瘤活性。

技术领域

本发明涉及抗肿瘤药物技术领域，特别涉及一种CRGD序列肽修饰壳聚糖负载的PAD4抑制剂及其制备方法和应用。

背景技术

据统计，癌症己经是绝大部分国家人口死亡的主要疾病，癌症细胞生长不受控，从宿主机体汲取养分可以无限生长繁殖，且癌症细胞的种类有很多种，因此对于癌症的治疗是非常具有挑战性的。

多肽精氨酸脱亚胺酶4(Peptidylarginine deiminase 4，PAD4)成为癌症的重要靶点之一。PAD4作为p53的辅辅助性抑制剂，能够与组蛋白去乙酰化酶HDAC2共同抑制抑癌基因(例如p21/CDKN1A和GADD45)的表达。但是PAD4具有较低的生物利用度。

为提高药物的生物利用度，采用药物载体对药物进行输送是一种常见的办法。发展到今天为止，已经有多种较为成熟药物载体，包括水溶性的高分子量聚合物载体、聚合物纳米颗粒、聚合物胶束、树枝状聚合物、脂质体、病毒粒子、碳纳米管和石墨烯氧化物等，但是，这些载体的主动靶向性往往不高。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种CRGD序列肽修饰壳聚糖负载的PAD4抑制剂及其制备方法和应用，本发明提供的CRGD序列肽修饰壳聚糖负载的PAD4抑制剂具有良好的主动靶向性和抗肿瘤活性。

为了实现上述发明的目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种CRGD序列肽修饰壳聚糖负载的PAD4抑制剂，包括CRGD序列肽修饰壳聚糖载体和负载于CRGD序列肽修饰壳聚糖载体表面的PAD4抑制剂；

所述CRGD序列肽中的半胱氨酸通过丙烯酰氯连接到壳聚糖表面。

优选的，所述CRGD序列肽包括CRGDV、CRGDS和CRGDF中的一种或几种。

优选的，所述PAD4抑制剂包括PAD4抑制剂4B、PAD4抑制剂3B、PAD4抑制剂 3B-OH中的一种或几种。

优选的，所述CRGD序列肽修饰壳聚糖负载的PAD4抑制剂中PAD4抑制剂的负载量为12～18wt％。

本发明提供了上述CRGD序列肽修饰壳聚糖负载的PAD4抑制剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)将壳聚糖、丙烯酰氯、第一缚酸剂与第一有机溶剂混合，进行亲核取代反应，得到丙烯酰氯修饰的壳聚糖；

(2)将所述丙烯酰氯修饰的壳聚糖、CRGD序列肽、第二缚酸剂与第二有机溶剂混合，进行迈克尔加成反应，得到CRGD序列肽修饰壳聚糖载体；

(3)将所述CRGD序列肽修饰壳聚糖载体、PAD4抑制剂与第三有机溶剂搅拌混合，得到CRGD序列肽修饰壳聚糖负载的PAD4抑制剂。

优选的，所述壳聚糖与丙烯酰氯的摩尔比为1.5～3:1，所述壳聚糖与CRGD序列肽的摩尔比为1～2:1.8。

优选的，所述壳聚糖与PAD4抑制剂的摩尔比为1:1～5。

优选的，所述亲核取代反应的时间为12～24h。

优选的，所述迈克尔加成反应的时间为12～24h。