[发明专利]一种新型冠状病毒多重检测的RT-LAMP引物组合及其试剂盒

说明书

本发明公开了一种新型冠状病毒多基因检测的RT‑LAMP引物组合及其试剂盒。所述的RT‑LAMP引物组合包含以下引物组A～G中任意两组及以上的RT‑LAMP引物组合，分别靶向S、E、M、N、ORF1ab、ORF3a和ORF7a基因，由SEQ ID No.1～42所示的核苷酸序列组成。用其制得的试剂盒是把RT‑LAMP与蜂巢芯片结合，将不同引物预固定在不同的毛细管内，同时设置阳性对照和阴性对照，实现新型冠状病毒的多基因检测，提高准确性。本发明采取等温扩增技术，不依赖精密仪器和复杂操作，并结合蜂巢芯片实现多重可视化检测，单个反应检测7个基因，具有准确、快速、简便等优点，适用于新冠病毒的鉴别诊断。

技术领域

本发明涉及生物医学检测技术领域，具体涉及一种新型冠状病毒多基因检测的RT-LAMP引物组合及其试剂盒，尤其涉及一种基于蜂巢芯片的新型冠状病毒多重核酸检测试剂盒。

背景技术

新型冠状病毒肺炎(COVID-19)是由严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(SARS-CoV-2)感染引起的以肺部病变为主的急性呼吸道传染病(Hui DS,et al.,Int J Infect Dis,2020Feb；91:264-266)。截至2021年4月7日，全球确诊病例超过1.3亿，致死人数超过280万(http://2019ncov.chinacdc.cn/2019-nCoV/global.html)，并且仍在增长中。虽然目前国内外已有12款疫苗获得批准上市(https://covid19.trackvaccines.org/)，但具体效果仍待进一步评估，并且变异的病毒株也对疫苗的广谱性和有效性提出了更高的要求，例如英国突变株B.1.1.7和南非突变株B.1.351对疫苗的中和活性具有抵抗性(Garcia-Beltran,WF,et al.,Cell.2021,Mar 12:S0092-8674(21)00298-1；Wang GL,et al.,N Engl JMed.2021Apr 6.doi:10.1056/NEJMc2103022)。因此，开发针对SARS-CoV-2的快速、准确、简便的检测方法仍至关重要。SARS-CoV-2是单股正链RNA病毒，基因组具有很高的变异性。2020年3月3日，Tang等人就报道通过对103个SARS-CoV-2基因组的比较分析发现了149个突变位点(Tang X,et al.,National Science Review,2020,7:1012–1023)。因此，为了提高检测的准确性，开发多基因检测的方法非常重要。