[发明专利]一种荧光分析法检测水产品中敌敌畏残留量的方法及检测试剂盒有效

专利信息
申请号: 202110658908.1 申请日: 2021-06-15
公开(公告)号: CN113203720B 公开(公告)日: 2022-09-06
发明(设计)人: 王晓闻;王慧慧;李琳慧;王愈;武蓓琪;齐艳丽;荆旭 申请(专利权)人: 山西农业大学
主分类号: G01N21/64 分类号: G01N21/64
代理公司: 北京中济纬天专利代理有限公司 11429 代理人: 杨永莉
地址: 030801 山西*** 国省代码: 山西;14
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摘要:
搜索关键词: 一种 荧光 分析 检测 水产品 敌敌畏 残留 方法 试剂盒
【权利要求书】:

1.一种荧光分析法检测水产品中敌敌畏残留量的方法,其特征在于,其包括如下步骤:

S1、样品预处理:将水产品样品粉碎,准确称取粉碎后样品于离心管中,加入乙腈溶液,涡旋后静置,上清液过滤膜后置于离心管中;

S2、样品提取:取上述滤液于新的离心管中,加盐酸溶液、氯化钠和壬酸钠,待样品溶液分层后离心,冰浴固化,倒掉下层溶液,留取上层提取液;

S3、样品检测:取融化后的上层提取液,加入氨水和间苯二酚溶液在水浴中进行反应,待颜色稳定后,用多功能酶标仪进行荧光检测;

S4、标曲制作:配置不同浓度的敌敌畏标准品,向离心管直接添加不同浓度的敌敌畏标准溶液,静置后有机溶剂挥发完全;加入乙腈,按步骤S1、S2和S3进行提取和荧光检测;以敌敌畏浓度为横坐标,荧光值为纵坐标绘制标准曲线;

S5、检测结果:将步骤S3中所测样品的荧光值代入标准曲线中即可获得样品中敌敌畏的残留量。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,在步骤S1中,所述粉碎样品质量为1 g,所述乙腈的体积为1 mL;所述涡旋转速为2500 r/min,涡旋时间为2~5 min,所述静置时间为3~5 min;所述滤膜为0.22 µm的有机滤膜。

3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,在步骤S2中,所述滤液体积为0.5~0.9 mL,所述盐酸溶液的浓度为0.1~0.7 mol/L,体积为4.5 mL;所述氯化钠用量为75~225 mg;壬酸钠用量为100~200 mg;所述离心条件为3000~8000 r/min,离心时间为3~10 min。

4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述滤液体积为0.5 mL,所述盐酸溶液的浓度为0.5 mol/L;所述氯化钠用量为150 mg;壬酸钠用量为150 mg;所述离心条件为5000 r/min,离心时间为5 min。

5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,在步骤S3中,所述上层提取液的体积为50 μL;所述氨水的质量分数为15~25%,氨水体积为100 μL;所述间苯二酚溶液的浓度为45~225 mmol/L,用无水乙醇进行配置,间苯二酚溶液的体积为200 μL。

6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,在步骤S3中,所述水浴的温度为25~35℃,水浴时间为5~15 min。

7.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述氨水的质量分数为25%,所述间苯二酚溶液的浓度为90 mmol/L,水浴的温度为25℃,水浴的时间为10 min。

8.如权利要求1所述的方法,其特征在于,在步骤S3中,用多功能酶标仪测定荧光强度时,所用的激发波长为275 nm,发射波长为315 nm。

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