[发明专利]一种荧光分析法检测水产品中敌敌畏残留量的方法及检测试剂盒

说明书

本发明涉及一种荧光分析法检测水产品中敌敌畏残留量的方法及检测试剂盒。方法包括如下步骤：将水产品样品经过预处理得到乙腈提取液，在乙腈提取液中加入盐酸溶液、氯化钠、以及壬酸钠提取剂，实现样品中的敌敌畏实现高效萃取，冰浴固化有机相，弃去下层水相，向留下的上层提取液中加入氨水溶液，再加入间苯二酚溶液进行反应后，检测荧光值；同时准备配制不同浓度敌敌畏标准溶液进行上述检测，测得荧光值后，绘制标准曲线，根据标准曲线即可获得样品中敌敌畏含量。本发明建立的方法具有绿色环保、高效、提取效果好、提取效率快等优点，使用的检测仪器操作简单，实验结果准确可靠，灵敏度高，且重现性好，可以实现现场快速检测。

技术领域

本发明涉及一种荧光分析法检测水产品中敌敌畏残留量的方法及检测试剂盒，属于食品检测技术领域。

背景技术

敌敌畏(DDVP)，学名O,O-二甲基-O-(2,2-二氯乙烯基)磷酸酯，是一种高效的有机磷杀虫剂，广泛应用于农业生产中。然而由于不合理的使用以及滥用，在降雨等作用的影响下导致水体中敌敌畏的残留量增加，并在水生生物体内不断富集，对水环境以及水生生物造成严重的影响。人们食用含有敌敌畏的水产品后，敌敌畏会在体内不断蓄积，从而对人体产生毒害作用。敌敌畏与人体内的胆碱酯酶结合，使胆碱酯酶丧失了水解乙酰胆碱的功能，导致胆碱能神经递质大量积聚，造成严重的神经功能紊乱，特别是呼吸功能障碍，从而影响生命活动，严重时可因肺水肿、脑水肿、呼吸麻痹而死亡。重度中毒者还会发生迟发性猝死。因此，需要建立敌敌畏的快速便捷检测方法来监测水产品中的残留量。

国内外检测敌敌畏残留量的方法有很多，如气相色谱法、薄层色谱扫描法、气相色谱-质谱联用分析法、免疫传感器法等。虽然上述方法检测效率高、选择性好、应用范围广，但需要昂贵的仪器、专业的操作人员、复杂的程序、繁琐的样品处理过程，以及合成的材料不稳定等缺点，极大地限制了其在现场检验中的应用。因此，需要建立一种检测结果准确、仪器操作简单、高效环保的提取检测方法，普通实验室就可达到检测条件的仪器来测定水产品中敌敌畏的残留量。

发明内容

(一)要解决的技术问题

为了解决现有技术的上述问题，本发明提供一种荧光分析法检测水产品中敌敌畏残留量的方法及检测试剂盒，具体是涉及水产品中敌敌畏残留的快速准确便捷的荧光分析检测方法。

(二)技术方案

为了达到上述目的，本发明采用的主要技术方案包括：

一种荧光分析法检测水产品中敌敌畏残留量的方法，其包括如下步骤：

S1、样品预处理：将水产品样品粉碎，准确称取粉碎后样品于离心管中，加入乙腈溶液，涡旋后静置，上清液过滤膜后置于的离心管中；

S2、样品提取：取上述滤液于新的离心管中，加盐酸溶液、氯化钠和壬酸钠，待样品溶液分层后离心，冰浴固化，倒掉下层溶液，留取固相的上层提取液；

S3、样品检测：取融化后的上层提取液，加入氨水和间苯二酚溶液在水浴中进行反应，待颜色稳定后，用多功能酶标仪进行荧光检测；

S4、标曲制作：配置不同浓度的敌敌畏标准品，向离心管直接添加不同浓度的敌敌畏标准溶液，静置后有机溶剂挥发完全；加入乙腈，按步骤S1、S2和S3进行提取和荧光检测；以敌敌畏浓度为横坐标，荧光值为纵坐标绘制标准曲线；

S5、检测结果：将S3中所测样品的荧光值代入标准曲线中即可获得样品中敌敌畏的残留量。

如上所述的方法，优选地，在步骤S1中，所述粉碎样品质量为1g，所述乙腈的体积为1mL；所述涡旋转速为2500r/min，涡旋时间为2～5 min，所述静置时间为3～5min；所述滤膜为0.22μm的有机滤膜。