[发明专利]一种基于量子点荧光微球探针检测氯霉素的方法

说明书

本发明涉及一种基于量子点荧光微球探针检测氯霉素的方法，包括：(1)制备羧基化Mn‑ZnS量子点荧光纳米微球；(2)制备Mn‑ZnS量子点纳米微球‑氯霉素荧光探针；(3)氯霉素荧光试纸条构建和检测方法；(4)将步骤(2)的Mn‑ZnS量子点‑氯霉素荧光探针与待测样品混合滴加于样品垫上；(5)4‑5min后根据试纸条上的荧光强度得到检测结果。本发明提高了荧光探针的稳定性和灵敏度；一步合成的具有羧基和氨基修饰的Mn‑ZnS量子点，提高了该量子点在水相溶剂中的分散性和稳定性，增加了Mn‑ZnS量子点偶联氯霉素抗体后荧光探针的灵敏度和稳定性，氯霉素荧光试纸条稳定性好，灵敏度高，商业应用价值好。

技术领域

本发明属于材料、生物、生物检测等交叉领域，特别涉及基于量子点荧光微球探针检测氯霉素的方法。

背景技术

氯霉素(Chloramphenicol，CAP)是一种广谱酰胺醇类抗生素类药物，对炭疽杆菌、肺炎球菌、链球菌、李斯特菌、葡萄球菌以及衣原体、立克次氏体等病原微生物具有良好的抑制效果，可用于伤寒、脑膜炎和尿路感染等疾病的治疗与预防。然而，CAP对人体具有较大的毒副作用，如抑制骨髓造血功能。此外，CAP理化性质极为稳定，不易降解，可通过食物链在人体内蓄积，从而对人体健康造成严重损害。

量子点(QDs)作为一种性能优良的荧光探针被广泛的应用于生物标记、环境监测等各个领域中，深受科学家们的青睐。其中锰掺杂硫化锌量子点，即保留了宿主ZnS原有的荧光特性，且掺杂的锰离子的发光寿命达ms级(约1.1ms)，可有效的避免背景荧光和散射光的干扰。

Mn-ZnS QDs量子产率高、分散性较好、稳定性高，然而该量子点因表面的疏水性质而不能直接应用到生物体系中，需要对其进行配体交换，再将制得水溶性量子点应用到生物体系中，步骤繁琐。

发明内容

发明目的

本发明针对目前缺乏快速、简便、灵敏度高、准确的检测氯霉素的方法，提供一种基于量子点荧光微球探针检测氯霉素的方法。该方法过程简单、灵敏度高、快速、稳定性好，可广泛推广用于氯霉素检测。

技术方案

一种基于量子点荧光微球探针检测氯霉素的方法，其特征在于，步骤如下：

(1)制备羧基化Mn-ZnS量子点荧光纳米微球；所述羧基化Mn-ZnS量子点荧光纳米微球直径为4±0.5nm；

所述羧基化Mn-ZnS量子点荧光纳米微球，由以下步骤的方法制得：

将ZnSO₄、MnCl₂和谷胱甘肽溶于超纯水中，用0.01mol/L的NaOH调节溶液pH值为11，通入氮气条件下磁力搅拌30-40min后加入Na₂S溶液，继续搅拌20-30min后，将温度升至55-60℃时停止通入氮气，继续反应2-4小时；ZnSO₄、MnCl₂和谷胱甘肽的摩尔比为2.5：0.1：5；MnCl₂与Na₂S的摩尔比为1：25；MnCl₂与超纯水的摩尔体积比为0.01：50(mmol：mL)；

反应结束后，加入等体积的乙醇使合成的量子点沉淀，在10000-12000rpm转速下离心分离，去除液体，获得产物，产物用去离子水洗涤大于等于5次去除未反应的原料，产物在低温干燥后备用。

(2)利用步骤(1)制备的羧基化Mn-ZnS量子点荧光纳米微球加入氯霉素单克隆抗体，制备Mn-ZnS量子点纳米微球-氯霉素荧光探针；

所述制备的羧基化Mn-ZnS量子点荧光纳米微球和氯霉素单克隆抗体，制备Mn-ZnS量子点纳米微球-氯霉素荧光探针，由包括以下步骤的方法制得：