[发明专利]一种芬太尼代谢标志物的检测试剂盒及其检测方法和应用

说明书

本发明公开了一种芬太尼代谢标志物的检测试剂盒及其检测方法和应用，其中，所述检测试剂盒用于检测芬太尼代谢标志物ABCB C3435T、OPRM1A118G两个基因的基因多态性，试剂盒包括如下组分：ABCB1C3435T扩增引物、ABCB1C3435T测序引物、OPRM1A118G扩增引物、OPRM1A118G测序引物和阳性对照。本发明以血液直扩、快速扩增和优化焦磷酸测序技术为组合对芬太尼剂量和疗效预测相关的基因多态性进行检测，为芬太尼剂量和疗效预测临床使用给出基因角度的建议。

技术领域

本发明涉及一种芬太尼代谢标志物的检测试剂盒及其检测方法和应用，属于基因检测领域。

背景技术

疼痛是中晚期癌症患者的常见症状之一，目前世界疼痛大会已将疼痛确认为“第五大生命指征”。据估计，全球上千万癌症患者中，约30％以上的患者有不同程度的癌症相关性疼痛晚期癌症患者的疼痛发生率高达75％。药物治疗是癌症疼痛治疗的主要方法之一，而阿片类止痛药物是中重度癌痛治疗的一线药物，其中包括吗啡、羟考酮、芬太尼等，不同患者阿片类药物有效镇痛剂量有明显个体差异。由于受到多种因素的影响，我国仅有41％的癌痛患者能够得到有效治疗，而晚期癌痛患者中仅25％可以得到有效缓解。阿片类药物的镇痛作用及不良反应主要通过阿片受体介导，经典阿片受体有μ阿片受体(MOR)、δ阿片受体(DOR)及κ阿片受体(KOR)，其中μ阿片受体是目前大多数阿片类药物的主要作用受体。μ阿片受体又可分为μ1和μ2两种亚型，阿片类药物主要激动μ1受体产生镇痛作用，激动μ2受体产生不良。目前现有阿片类药物对μ阿片受体激动无明显选择性,研究发现，μ阿片受体编码基因(OPRM1)多态性与阿片类药物镇痛作用有关，以A118G位点关系最为密切，该基因位点突变常导致镇痛疗效、不良反应和阿片耐受出现个体差异，以及阿片成瘾倾向的变化。

OPRM1(A118G)基因突变会引起编码μ阿片受体蛋白改变，影响吗啡活性代谢产物吗啡－6－葡萄糖醛酸对受体的激动，导致吗啡的镇痛疗效存在个体差异。A118G突变是OPRM1基因第118位的核苷酸由腺苷酸(A)突变为鸟苷酸(G)，使μ阿片受体第40位氨基酸天冬酰胺被天冬氨酸取代。OPRM1(A118G)基因可根据突变类型分为AA型、AG型及GG型三种基因型。AG及GG基因型为G等位基因携带，AA及AG基因型为A等位基因携带。OPRM1(A118G)基因位点突变也使得μ阿片受体的数量减少及其活化受抑制，最终导致阿片类药物作用效能下降，在癌症患者吗啡镇痛治疗的研究中发现，OPRM1(A118G) 基因G等位基因的携带会增加吗啡的使用剂量。OPRM1(A118G)基因突变会降低癌痛患者对阿片类药物的敏感性，导致镇痛作用下降，从而增加阿片类药物用量