[发明专利]使用基因组特异性探针的循环肿瘤和肿瘤干细胞检测

权利要求书

1.在含血细胞样品中检测循环肿瘤细胞(CTC)的方法，其包括：

(a)通过评估核面积和/或圆度来从含血细胞样品中选择CTC；

(b)使所选择的细胞与针对3p22.1、10q22.3、10号染色体着丝粒(cep10)和3号染色体着丝粒(cep3)的经标记核酸探针杂交；

(c)通过检测细胞的荧光原位杂交来评价所选择的细胞的信号模式；以及

(d)基于所有4种经标记核酸探针与所述选择的细胞杂交的模式来检测CTC。

2.权利要求1所述的方法，其还包括在步骤(b)之前过滤所述血液样品。

3.权利要求2所述的方法，其中过滤包括使用真空装置和穿孔有7.5μm孔的膜。

4.权利要求3所述的方法，其中所述血液样品是外周血单个核细胞的梯度分离样品。

5.权利要求1所述的方法，其中所述血液样品是通过Ficoll-Hypaque梯度从血液中分离的血沉棕黄层。

6.权利要求5所述的方法，其中所述血沉棕黄层进一步通过基于CD45珠的纯化进行纯化以除去白细胞。

7.权利要求1所述的方法，其中所述血沉棕黄层进一步通过基于CD3珠的纯化进行纯化以除去白细胞。

8.权利要求1所述的方法，其中患者已知或怀疑患有癌症。

9.权利要求8所述的方法，其中所述癌症是引起血源性转移的癌症形式。

10.权利要求8所述的方法，其中所述癌症是肺、头和颈、乳腺、结肠、前列腺、胰腺、食管、肾的癌症，胃肠肿瘤、泌尿生殖肿瘤、肾、黑素瘤、内分泌肿瘤(甲状腺，例如乳头状甲状腺癌(PTC)；肾上腺皮层或髓质)或肉瘤。

11.权利要求1所述的方法，其中染色还包括使所述样品与经标记的CD45抗体、经标记的SNAIL1抗体，和/或经标记的抗GLUT1抗体接触。

12.权利要求11所述的方法，其中所述标记为荧光标记或生色原标记。

13.权利要求1所述的方法，其中检测信号包括使用自动化荧光扫描仪。

14.权利要求1所述的方法，其还包括在步骤(b)至(d)中使用并检测一种或更多种另外的探针。

15.权利要求14所述的方法，其中所述探针还包含UroVysion DNA探针组。

16.权利要求14所述的方法，其中所述探针还包含LaVysion DNA探针组。

17.权利要求14所述的方法，其中所述探针还包含着丝粒7/7p12表皮生长因子(EGFR)探针。

18.权利要求14所述的方法，其中所述探针还包含cep7/7p22.1、cep17和9p21.3探针。

19.权利要求14所述的方法，其中所述探针还包含EGFR/cep和10/cep10q探针。

20.权利要求14所述的方法，其中所述探针还包含pTEN、cep10和cep10q探针。

21.权利要求14所述的方法，其中所述探针还包含EML4-ALK探针组。