[发明专利]一种针对中华绒螯蟹螺原体的特异性卵黄抗体及其制备方法和应用有效
申请号: | 202110665691.7 | 申请日: | 2021-06-16 |
公开(公告)号: | CN113527480B | 公开(公告)日: | 2023-05-12 |
发明(设计)人: | 曹晓慧;刘鸿丽;顾伟;王文;孟庆国 | 申请(专利权)人: | 南京师范大学 |
主分类号: | C07K16/18 | 分类号: | C07K16/18;C07K16/02;A61K39/40;A61P31/04 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 曹翠珍 |
地址: | 210046 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 针对 中华 绒螯蟹螺 原体 特异性 卵黄 抗体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种针对中华绒螯蟹螺原体的特异性卵黄抗体在制备中华绒螯蟹抵抗Spiroplasmaeriocheiris感染的饲料或药物中的应用,其特征在于,所述抗体为抗S.eriocheiris的特异性IgY抗体,是由破碎后的螺原体注射进母鸡体内,从鸡蛋的卵黄中分离并纯化得到的特异性抗体;
其制备方法包括以下步骤:
步骤1)将S.eriocheiris在R2培养基中培养24h后离心去上清,并用PBS重悬;步骤2)将经步骤1)重悬后的S.eriocheiris进行超声破碎,并于20℃保存备用;步骤3)对母鸡进行肌肉注射,注射1mL 200~400μg/mL经步骤2)破碎后的S.eriocheiris,生产特异性抗体IgY;
步骤4)对母鸡进行3次注射,间隔2周,每天收集鸡蛋,直至第九周,提取鸡蛋卵黄,从卵黄中分离出IgY并纯化,即得。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述饲料的制备方法包括以下步骤:
步骤A)从注射了400μg/mL的S.eriocheiris的鸡卵黄中分离出IgY并纯化;将分离纯化的IgY以滴度为1:10000的比例进行稀释,得到特异性IgY;
步骤B-1)将步骤A)制得的特异性IgY与商品饲料混合,混合质量比为1:4,并用蛋清作为粘合剂,即得。
3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述药物的制备方法包括以下步骤:
步骤A)从注射了400μg/mL的S.eriocheiris的鸡卵黄中分离出IgY并纯化;将分离纯化的IgY以滴度为1:10000的比例进行稀释,得到特异性IgY;
步骤B-2)将步骤A)制得的特异性IgY与PBS按体积比为1:4进行混合,即得。
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