[发明专利]猪圆环病毒2型LAMP检测引物组及试剂盒在审
申请号: | 202110665709.3 | 申请日: | 2021-06-16 |
公开(公告)号: | CN113337641A | 公开(公告)日: | 2021-09-03 |
发明(设计)人: | 俞国华;杨小燕;戴爱玲;范克伟;刘建奎;黄翠琴;杨守深;尹会方;李晓华;王鑫;包银莉 | 申请(专利权)人: | 龙岩学院 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/93 |
代理公司: | 福州君诚知识产权代理有限公司 35211 | 代理人: | 戴雨君 |
地址: | 364012*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 圆环 病毒 lamp 检测 引物 试剂盒 | ||
1.猪圆环病毒2型LAMP检测引物组,其特征在于,该引物组包括6条引物,6条引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO. 1- SEQ ID NO.6所示,具体如下:
SEQ ID NO. 1(PCV2-F3): 5′ -gctgtgagtaccttgttggag-3′
SEQ ID NO. 2(PCV2-B3): 5′ -acaaccacttcttcaccatg-3′
SEQ ID NO. 3(PCV2-FIP): 5′ -tgcattttcccgctcactttcttgcagagcagcaccctgtaac-3′
SEQ ID NO. 4(PCV2-BIP): 5′ -atgtacacgtcattgtggggttctaggtggtttccagtatgtg-3′
SEQ ID NO. 5(PCV2-LF): 5′ -agcccgcggaaatttctg-3′
SEQ ID NO. 6(PCV2-LB): 5′ -gtgtggcaaaagcaaatgg-3′。
2.猪圆环病毒2型LAMP检测试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒包含权利要求1所述的引物组。
3.根据权利要求2所述的猪圆环病毒2型LAMP检测试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒还包含Bst DNA聚合酶、dNTP、MgSO4、Betaine、10X LAMP反应缓冲液、对反应结果起指示作用的指示剂或荧光染料。
4.根据权利要求3所述的猪圆环病毒2型LAMP检测试剂盒,其特征在于,所述的对反应结果起指示作用的指示剂或荧光染料为HNB、钙黄绿素、SYTO-9、SYBR Green或Eva Green。
5.根据权利要求4所述的猪圆环病毒2型LAMP检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒的各组分及其含量如下:引物组 2 μL、8 Units /μL Bst DNA聚合酶 2.4 μL、25 mM dNTP 3μL、150 mM MgSO4 2 μL、5 M Betaine 10 μL、10X LAMP反应缓冲液 6 μL、3 mM HNB 2.4 μL、用去离子水补足到40 μL;
所述引物组中,各引物的摩尔浓度如下:PCV2-F3和PCV2-B3 的摩尔浓度均为20 μM,PCV2-FIP和PCV2-BIP的摩尔浓度均为160 μM,PCV2-LF和PCV2-LB的摩尔浓度均为80 μM。
6.根据权利要求2所述的猪圆环病毒2型LAMP检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包含阳性对照质粒。
7.根据权利要求2所述的猪圆环病毒2型LAMP检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒的反应条件为:61 ℃, 60 min。
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