[发明专利]一种基于白刺果实提取物的天然花色苷制备方法

权利要求书

1.一种基于白刺果实提取物的天然花色苷制备方法，其特征在于：所述方法是通过以下步骤实现的：

步骤一：清洗消毒：将白刺干果浸入0.5％-1％亚硫酸氢钠溶液浸泡5-15min；

步骤二：籽肉分离：将步骤一中经过浸泡后的白刺干果用清水冲洗后放于组织匀浆机中搅拌，使白刺果核与果肉分离得到果浆；

步骤三：酶解-酸化乙醇超声辅助萃取：对步骤二中得到的果浆进行粗过滤得到果浆提取液，并在果浆提取液添加中总溶液质量分数分别为3％和1％的纤维素酶和果胶酶，经酸性试剂调试pH至4-6，然后在酶解后的白刺果浆中加入乙醇溶液，再次经酸性试剂调试pH至2-3，并快速搅拌混匀，后进行超声辅助萃取，酶解温度控制在40℃-55℃，时间为80-100min，超声辅助萃取的频率为40KHz，功率200W-300W，时间20-40min；

步骤四：去除杂质：将步骤三中经过超声辅助萃取后的果浆提取液过200目网纱后于低温下静置12-24h，经高速冷冻离心机离心后去除部分多糖、大部分果胶以及蛋白质等杂质并经砂芯过滤装置进一步过滤；高速冷冻离心机转速设置8000-12000r·min^-1，时间5-15min，将离心后的滤液转入旋转蒸发器中浓缩，并回收乙醇，温度设置为55-65℃；

步骤五：树脂吸附：将步骤四中进一步去除杂质后的果浆提取液用预处理过的大孔树脂进行充分吸附，并在振荡培养箱中室温振荡，转速在80-120r·min^-1，3-4h后除去上清液,并提取大孔树脂；

步骤六：树脂解吸附：加入2-3倍于树脂体积的60-70％乙醇溶液浸提步骤五中提取的大孔树脂，并于恒温振荡培养箱中振荡3-4h，保持转速在80-120r·min^-1，经充分洗脱后取上层提取液，最后冲洗回收树脂；

步骤七：微滤-超滤-纳滤浓缩纯化：将步骤六中得到的上层提取液过滤膜抽滤，所得滤液先经截留分子量为30-50KDa的超滤管离心，所得上清液再经截留分子量为3-5KDa纳滤管离心，得到浓缩纯化后的白刺果实花色苷提取液；

步骤八：冷冻干燥：先将步骤七中得到的白刺果实花色苷提取液放入超低温冰箱进行预冻，再将预冻后的白刺果实花色苷提取液经真空冷冻干燥机冷冻制备，48h后即可得干燥白刺花色苷粉末。

2.根据权利要求1中所述的一种基于白刺果实提取物的天然花色苷制备方法，其特征在于：所述步骤三中酸性试剂为柠檬酸、酒石酸和苹果酸中的一种。

3.根据权利要求1中所述的一种基于白刺果实提取物的天然花色苷制备方法，其特征在于：所述步骤三中在酶解后的白刺果浆中加入乙醇溶液的体积比为1：10-1：15。

4.根据权利要求1中所述的一种基于白刺果实提取物的天然花色苷制备方法，其特征在于：所述步骤四中将步骤三中经过超声辅助萃取后的果浆提取液过200目网纱后于-20℃下静置12-24h。

5.根据权利要求1中所述的一种基于白刺果实提取物的天然花色苷制备方法，其特征在于：所述步骤四可根据实际除杂情况重复三至五次。

6.根据权利要求1中所述的一种基于白刺果实提取物的天然花色苷制备方法，其特征在于：所述步骤五中大孔树脂的型号为AB-8、ADS-8、D101、NKA-9、HPD-100或XDA-6，在进行树脂吸附时可以选用上述型号中的一种或几种树脂共同完成吸附工作。

7.根据权利要求1中所述的一种基于白刺果实提取物的天然花色苷制备方法，其特征在于：所述步骤六树脂解吸附的过程需重复三次。

8.根据权利要求1中所述的一种基于白刺果实提取物的天然花色苷制备方法，其特征在于：所述步骤七中的滤膜为0.22μm微孔滤膜。

9.根据权利要求1中所述的一种基于白刺果实提取物的天然花色苷制备方法，其特征在于：所述步骤八中将步骤七中得到的白刺果实花色苷提取液放入超低温冰箱进行预冻的时间为12h。