[发明专利]一种敲除H3L基因的重组痘苗病毒载体

权利要求书

1.一种敲除H3L基因的重组痘苗病毒载体，其特征在于，所述重组痘苗病毒载体的H3L编码基因被敲除，且不能正常表达H3L基因。

2.根据权利要求1所述的一种敲除H3L基因的重组痘苗病毒载体，其特征在于，所述痘苗病毒载体为复制型痘苗病毒载体或非复制型痘苗病毒载体。

3.根据权利要求2所述的一种敲除H3L基因的重组痘苗病毒载体，其特征在于，所述H3L敲除是通过在H3L两端的核酸序列中插入一段核酸序列，使得H3L基因突变，实施敲除，所述核酸序列包括至少一个痘苗病毒启动子元件，或至少一个报告基因或一个抗性基因，所述核酸序列还包括除报告基因或抗性基因以外的一个或多个外源基因。

4.根据权利要求3所述的一种敲除H3L基因的重组痘苗病毒载体，其特征在于，所述痘苗病毒启动子元件为P7.5或PE/L，优选地，所述P7.5的核酸序列为SEQ ID NO:13，所述PE/L的核酸序列为SEQ ID NO:14。

5.根据权利要求4所述的一种敲除H3L基因的重组痘苗病毒载体，其特征在于，所述报告基因为荧光蛋白编码基因或半乳糖苷酶编码基因。

6.根据权利要求3所述的一种敲除H3L基因的重组痘苗病毒载体，其特征在于，所述H3L两端的核酸序列分别为H3L-L同源重组臂或H3L-R同源重组臂，其中，所述H3L-L同源重组臂核酸序列为SEQ ID NO:1，所述H3L-R同源重组臂核酸序列为SEQ ID NO:2。

7.根据权利要求6所述的一种敲除H3L基因的重组痘苗病毒载体，其特征在于，所述H3L敲除的重组痘苗病毒载体为rvv-ΔH3L/G。

8.一种用来构建的H3L基因敲除的重组痘苗病毒载体的穿梭载体，其特征在于，所述穿梭载体含有H3L同源重组臂序列。

9.根据权利要求8所述的穿梭载体，其特征在于，所述穿梭载体含有H3L-L同源重组臂序列，其中，所述H3L-L同源重组臂核酸序列为SEQ ID NO:1。

10.根据权利要求9所述的穿梭载体，其特征在于，所述穿梭载体还含有H3L-R同源重组臂序列，其中，所述H3L-R同源重组臂核酸序列为SEQ ID NO:2。

11.根据权利要求10所述的穿梭载体，其特征在于，所述穿梭载体在H3L同源重组臂序列之间还插入了一段核酸序列，所述核酸序列包括至少一个痘苗病毒启动子元件，或至少一个报告基因或一个抗性基因，所述核酸序列还包括除报告基因或抗性基因以外的一个或多个外源基因。

12.根据权利要求11所述的一种用来构建H3L基因敲除的重组痘苗病毒载体的穿梭载体，其特征在于，所述痘苗病毒启动子元件为P7.5或PE/L，优选地，所述P7.5的核酸序列为SEQ ID NO:13，所述PE/L的核酸序列为SEQ ID NO:14。

13.根据权利要求12所述的一种用来构建H3L基因敲除的重组痘苗病毒载体的穿梭载体，其特征在于，所述报告基因为荧光蛋白编码基因或半乳糖苷酶编码基因。

14.根据权利要求13所述的一种用来构建H3L基因敲除的重组痘苗病毒载体的穿梭载体，其特征在于，所述穿梭载体为pΔH3L-GFP，其核酸序列为SEQ ID NO:17。