[发明专利]一组用于鉴定山桃杂交群体抗/感桃蚜性状的InDel标记及其应用

说明书

本发明公开了一组用于鉴定山桃杂交群体抗/感桃蚜性状的InDel标记及其应用，该InDel标记包括InDel‑1标记和InDel‑2标记，其中，InDel‑1标记的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，InDel‑2标记的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明针对InDel‑1和InDel‑2标记设计两组InDel引物对，并对InDel‑1对应引物对所扩增的PCR扩增产物进行电泳检测，对InDel‑2对应引物对所扩增的PCR扩增产物进行测序，根据结果预测山桃抗/感桃蚜性状。本发明对2个杂交群体共计224份待测单株进行分子标记基因型准确率验证，结果表明，验证准确率达96.88％。这说明利用本发明的核苷酸插入缺失(InDel)标记进行桃蚜抗性的鉴定，具有迅速、便捷、低成本等优点，能够在生产中实现大规模应用。

技术领域

本发明涉及一组用于鉴定山桃杂交群体抗/感桃蚜性状的InDel标记、引物对及其应用，属于生物技术领域。

背景技术

桃蚜是桃树生产上重要的害虫，春季2月中旬至3月中旬，越冬卵孵化的桃蚜幼虫只有取食桃和山桃的叶片才能成活长大，因此对早期桃树萌发的新梢和幼叶造成直接危害。受桃蚜侵食后的植物幼叶向反面横卷或不规则卷曲，阻碍叶片的营养吸收，使叶片营养恶化，甚至黄落。蚜虫排泄在叶片上的蜜露易诱发霉污病，干扰植物的光合作用；幼果被桃蚜叮咬后，果实畸形、品质下降。由于近年来烟碱类杀虫剂的广泛使用，桃蚜已经对其产生抗药性，防治难度增加；另外，广谱型杀虫剂的大量使用对授粉昆虫和天敌昆虫也产生严重危害，并对果园的生态环境造成破坏。因此挖掘抗性资源、开发与抗性性状紧密连锁的分子标记、培育抗桃蚜新品种是桃育种研究工作的重要环节。

有关抗桃蚜性状与分子标记定位的研究，国内外学者均有所涉及。目前的研究发现桃树对蚜虫的抗性分为两类，一种是单基因显性控制的抗性，另一种是多基因控制的抗性。法国科学家Sauge发现，垂枝花桃(weeping flower peach，WFP)和砧木品种‘Rubira’对桃蚜的抗性分别由Rm1和Rm2两个单显性基因控制，两者对桃蚜的抗性均为排趋性，表现为蚜虫在人工接种3-4天内离开寄主植物，并且在蚜虫感染2-3天内，蚜虫侵食的部位出现红色超敏坏死病斑。牛良发现，粉寿星(P.persica var.densa Makino)对蚜虫的抗性是由单基因Rm3显性控制的。Rm1、Rm2和Rm3都定位在桃1号染色体的狭窄区间(Rm1位于43.62～46.50Mb区间内，Rm2位于45.08～46.23Mb区间内，Rm3位于45.66～46.12Mb区间内)。与单基因控制的抗性相比，多基因控制的抗性更难被克服而且效果更持久。2012年，法国科学家Sauge鉴定出山桃(P.davidiana)单株P1908对蚜虫的抗性为韧皮部特异抗生性，对寄生蚜虫的取食和繁殖能力产生影响，这种抗性是由多基因控制的数量性状，8个数量性状位点(QTL)分布在7个连锁群上，其中主效抗性位点MP.SD-3.1位于3号染色体的分子标记AG106(31-38cM)附近。王力荣等通过对郑州的国家果树种质桃资源圃中的419份桃属资源进行抗桃蚜鉴定也发现山桃类品种的抗性最强。因此以山桃为抗性来源构建杂交群体，培育抗桃蚜新品种，对桃育种研究工作有重要意义。而开发与抗性性状紧密连锁的分子标记，在实生苗期就淘汰与抗性性状无关的植株，能够减小选择群体，降低选育成本，提高选育效率。

目前，已有的连锁标记距离抗桃蚜的基因距离较远，在杂交后代的早期鉴定中准确率较低。所以，开发准确性高、操作便捷的分子标记显得很有必要。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一组用于鉴定山桃杂交群体抗/感桃蚜性状的InDel标记、引物对及其应用，该标记在鉴定山桃杂交群体抗/感桃蚜(抗/感)性状时具有很高的准确性。

为了实现上述目的，本发明的技术方案之一是：

一组用于鉴定山桃杂交群体抗/感桃蚜性状的InDel标记，包括InDel-1标记和InDel-2标记，其中，InDel-1标记的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，InDel-2标记的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。