[发明专利]一种利脑心片中二苯乙烯苷含量的测定方法

说明书

本发明涉及一种利脑心片中二苯乙烯苷含量的测定方法，所述方法，步骤如下：步骤1，对照品溶液的制备：取二苯乙烯苷对照品，加稀乙醇制成对照品的溶液；步骤2，供试品溶液的制备：取利脑心片，加入稀乙醇溶液适量超声30min，滤过，滤液为供试品溶液；步骤3，阴性对照溶液的制备；步骤4，将对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液，注入高效液相色谱仪,记录色谱图，根据色谱图峰面积，按外标法计算供试品溶液中二苯乙烯苷的含量。

技术领域

本发明涉及一种中药有效成分的提取和检测方法，具体涉及利脑心片中二苯乙烯苷成分的提取和含量测定方法。

背景技术

利脑心片，中成药名。由丹参、川芎、葛根、地龙、赤芍、红花、郁金、制何首乌、泽泻、枸杞、炒酸枣仁、远志、九节菖蒲、牛膝、甘草组成。具有活血祛瘀，行气化痰，通络止痛的功效。用于治疗气滞血瘀，痰浊阻络，胸痹刺痛、绞痛，固定不移，入夜更甚，心悸不宁，头昏头痛，以及冠心病，心肌梗塞，脑动脉硬化，脑血栓等见上述症候者。

利脑心片是通过以下工艺制成的：将一定量的丹参、何首乌(制)、枸杞、赤芍、葛根、地龙加适量水煎煮三次，第一次3小时，第二次2小时，第三次1小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度1.2-1.5的清膏，备用；另取一定量的川芎、红花、郁金g、泽泻、、酸枣仁、远志、九节菖蒲、牛膝、甘草等九味粉碎成细粉，过100目筛，加入清膏中，混匀，干燥，干膏粉碎成细粉，加入羧甲淀粉钠5g，微晶纤维素40g，以60％的乙醇润湿，制颗粒，干燥，加入硬脂酸镁2g，淀粉适量调节总量至400g，压制成1000片，包薄膜衣，包装，即得。”

现有检测方法如下：

取本品15片，去薄膜衣，研细，取4g，加甲醇50ml，超声提取30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水15ml使溶解，用乙醚振摇提取3次，每次20ml，合并乙醚液，以乙酸乙酯振摇提取3次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，加5％碳酸氢钠溶液20ml洗涤1次，乙酸乙酯液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液。另取2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(SOP-QC-6060)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮-甲醇(6:1:2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

现有技术的缺陷如下：

原质量标准中二苯乙烯苷采用薄层色谱法鉴别，只能进行定性，无法定量。本发明的优点是采用HPLC-UV外标法，准确测定利脑心片中二苯乙烯苷的含量。该新的检测方法先进，精密度及重现性好，能够更好的对心脑心片进行质量控制，保证产品质量的稳定性均一性及用药安全性。

发明内容

本发明提供一种利脑心片中二苯乙烯苷含量的测定方法，所述方法，步骤如下：

步骤1，对照品溶液的制备：取二苯乙烯苷对照品，加稀乙醇制成对照品的溶液；

步骤2，供试品溶液的制备：取利脑心片，加入稀乙醇溶液适量超声30min，滤过，滤液为供试品溶液；

步骤3，阴性对照溶液的制备：按处方称取除制首乌以外的其他药材，按照处方、提取工艺、制剂工艺，在相同处方量比例下所称取不含制首乌的其余药材及辅料，配制成为缺制首乌的压片前的最终颗粒，再按照步骤2中供试品溶液的制备方法，配制得到缺制首乌阴性样品溶液；

步骤4，将对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液，注入高效液相色谱仪,记录色谱图，根据色谱图峰面积，按外标法计算供试品溶液中二苯乙烯苷的含量。

上述方法中，阴性对照溶液是任选的，即测定过程中，可以使用阴性对照溶液，也可以不使用。

优选的，本发明所述方法，步骤如下：