[发明专利]一种靶向FOLR1和HER2双打靶点CAR T的制备及应用

权利要求书

1.一种嵌合抗原受体CAR-免疫细胞，其特征在于，所述CAR-免疫细胞含有以下元件：

(a)第一CAR，所述的第一CAR的胞外结合域含有靶向第一靶蛋白的第一结合元件，并且所述的第一CAR的胞外结合域含有或不含有靶向第二靶蛋白的第二结合元件；

(b1)任选的第二CAR，所述的第二CAR的胞外结合域含有靶向第二靶蛋白的第二结合元件；

(b2)任选的编码BiTE的核酸序列，其中，所述的BiTE靶向第二靶蛋白；

其中，当所述的第一CAR的胞外结合域不含有靶向第二靶蛋白的第二结合元件时，所述的CAR-免疫细胞含有(b1)和/或(b2)元件；

并且，所述的第一靶蛋白为叶酸受体1(FOLR1)，并且第二靶蛋白为表皮生长因子受体2(HER2)；或者，所述的第一靶蛋白为所述的第一靶蛋白为表皮生长因子受体2(HER2)，并且第二靶蛋白为叶酸受体1(FOLR1)。

2.如权利要求1所述的CAR-免疫细胞，其特征在于，所述第一CAR或第二CAR的结构如下式I所示：

L-EB-H-TM-C-CD3ζ (I)

式中，

各“-”独立地为连接肽或肽键；

L为任选的信号肽序列；

EB为胞外结合域；

H为任选的铰链区；

TM为跨膜结构域；

C为共刺激信号分子；

CD3ζ为源于CD3ζ的胞浆信号传导序列。

3.权利要求1所述的CAR-免疫细胞，其特征在于，当所述的第二靶蛋白是HER2时，所述的BiTE是CD3 ScFv。

4.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码如权利要求1所述的CAR-免疫细胞中的元件(a)、(b1)和/或(b2)。

5.一种载体，其特征在于，所述的载体含有如权利要求4所述的核酸分子。

6.一种宿主细胞，其特征在于，所述的宿主细胞中含有如权利要求5所述的所述的载体或染色体中整合有外源的如权利要求4所述的核酸分子。

7.一种药物组合物，其特征在于，所述组合物含有药学上可接受的载体以及如权利要求1所述的CAR-免疫细胞、如权利要求4所述的核酸分子、如权利要求5所述的载体、或如权利要求6所述的宿主细胞。

8.如权利要求1所述的CAR-免疫细胞、如权利要求4所述的核酸分子、如权利要求5所述的载体、或如权利要求6所述的宿主细胞的用途，用于制备治疗肿瘤的药物或制剂。

9.如权利要求8所述的用途，其特征在于，所述的肿瘤是卵巢癌。

10.一种制备如权利要求1所述的CAR-免疫细胞的方法，其特征在于，所述方法包括步骤：将如权利要求4所述的核酸分子或如权利要求5所述的载体转导入免疫细胞内，从而获得所述的CAR-免疫细胞。