[发明专利]一种单细胞内抗原的无线电化学可视化分析方法有效
申请号: | 202110686537.8 | 申请日: | 2021-06-21 |
公开(公告)号: | CN113588950B | 公开(公告)日: | 2023-07-18 |
发明(设计)人: | 江德臣;王玉玲;徐静娟;陈洪渊 | 申请(专利权)人: | 南京大学 |
主分类号: | G01N33/574 | 分类号: | G01N33/574;G01N33/58;G01N33/573;G01N27/327;G01N27/49 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 张雅文 |
地址: | 210023 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 细胞内 抗原 无线 电化学 可视化 分析 方法 | ||
1.一种单细胞内抗原的无线可视化分析方法,其特征在于,包括以下步骤:
首先,将单臂碳纳米管标记在抗体上,将标记后的抗体与细胞共同孵育,使标记后的抗体进入细胞内,并与胞内对应的抗原结合;
然后,用多聚甲醛将细胞固定,用曲拉通X-100使细胞通透;
最后,将处理好的细胞包埋在含有发光试剂和缓冲溶液的琼脂糖水凝胶内,水凝胶中的混合液可通过通透的细胞膜进入到细胞内,通过馈电级在凝胶内施加电压,诱导细胞内的发光试剂在单壁碳纳米管上发生双极电化学发光反应,最终成像,实现细胞内抗原可视化;
其中,所述发光试剂为L012;所述电压为1 kV/cm~1.2 kV/cm;其中,单个SWCNTs-COOH的长度小于500 nm,宽度则小于10 nm;凝胶为孔径小于 70 μm的多孔结构,适合保留一个细胞。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述抗体为KDM1/LSD1抗体或癌胚抗原的抗体,所述方法不以获得疾病和/或健康状况为直接目的。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述细胞为人乳腺癌细胞,所述方法不以获得疾病和/或健康状况为直接目的。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述馈电级为石墨电极。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述电化学双极电化学发光反应成像的曝光时间为30s。
6.一种根据权利要求1所述的单细胞内抗原的无线可视化分析方法,在检测单细胞内抗原中的应用。
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