[发明专利]一种探针组、传感器、检测方法及其用途

权利要求书

1.探针组，其特征在于，包括：发夹探针HP1、发夹探针HP2和发夹探针HP3；

所述发夹探针HP1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述发夹探针HP2的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述发夹探针HP3的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

2.一种检测体系，其特征在于，包括权利要求1所述的探针组。

3.根据权利要求2所述的检测体系，其特征在于，

所述检测体系中，所述发夹探针HP1、发夹探针HP2和发夹探针HP3的摩尔比为1:1:（1-3）。

4.一种传感器，其特征在于，包括权利要求1所述的探针组或权利要求2或3所述的检测体系。

5.根据权利要求4所述的传感器，其特征在于，以总体积为100 μL为计，包括：

第一反应液，包括：

发夹探针HP1，浓度为0.8-1.2 μmol/L，3 μL；

发夹探针HP2，浓度为0.8-1.2 μmol/L，3 μL；

发夹探针HP3，浓度为0.8-1.2 μmol/L，6 μL；

T7核酸外切酶，浓度为8-12 U/μL，2 μL；和

第一反应缓冲液，36 μL。

6.根据权利要求5所述的传感器，其特征在于，

还包括第二反应液，包括：

第二反应缓冲液，48 μL；

AgNO₃溶液，浓度为50-70 μmol/L，1 μL；和

NaBH₄溶液，浓度为50-70 μmol/L，1 μL。

7.一种非疾病诊断目的生物靶标的检测方法，其特征在于，包括使用权利要求1所述的探针组、权利要求2或3所述的检测体系，或权利要求4-6任一项所述的传感器。

8.根据权利要求7所述的一种非疾病诊断目的生物靶标的检测方法，其特征在于，所述生物靶标为黄曲霉毒素B1。

9.根据权利要求8所述的一种非疾病诊断目的生物靶标的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1，将待测样品、发夹探针HP1、发夹探针HP2、发夹探针HP3和T7核酸外切酶在第一反应缓冲液中混合，混合液加热孵育，然后冷却至室温，得第一反应液；

S2，取第一反应液加入第二反应缓冲液中，然后向所述第二反应缓冲液中加入AgNO₃溶液，振荡后室温下避光孵育，然后加入还原溶液，室温下避光孵育，得第二反应液；

S3，对所述第二反应液进行荧光测定，实现对所述生物靶标的检测。

10.根据权利要求9所述的一种非疾病诊断目的生物靶标的检测方法，其特征在于，

所述步骤S1中，混合液加热孵育的条件为35-40 ℃孵育100-140分钟；和/或

所述第一反应缓冲液为NEBuffer 4缓冲液，所述第二反应缓冲液为柠檬酸钠缓冲液，所述还原溶液为NaBH₄溶液。

11.根据权利要求10所述的一种非疾病诊断目的生物靶标的检测方法，其特征在于，

所述NEBuffer 4缓冲液包含20 mM Tris-HNO₃, 50 mM KNO₃, 10 mM Mg(NO₃)₂, 所述NEBuffer 4缓冲液的pH 7.9；和/或

所述柠檬酸钠缓冲液包含10 mM 柠檬酸钠, 体积百分比0.05% Tween 20, 所述柠檬酸钠缓冲液的pH 7.0。