[发明专利]一种转染miRNA的细胞膜片及其应用

说明书

本发明涉及细胞修复技术领域，具体涉及一种转染miRNA的细胞膜片及其应用。一种转染miRNA的细胞膜片，所述细胞膜片由骨髓间充质干细胞组成；所述细胞膜片中MicroRNA let‑7a成熟体的含量上调；所述MicroRNA let‑7a成熟体的序列为5’‑UGAGGUAGUAGGUUGUAUAGUU‑3’。本方案在对细胞膜片的微环境的生物信号及分化机制进行更深入的研究的基础上，首次发现MicroRNA let‑7a对骨髓间充质干细胞成骨性能的正向诱导作用。本方案能够解决使用骨髓间充质干细胞修复颌骨缺损的效果不佳的技术问题，可以作为颌骨缺损修复材料应用于医疗实践中，进一步提升骨组织工程应用范围和认可度。

技术领域

本发明涉及细胞修复技术领域，具体涉及一种转染miRNA的细胞膜片及其应用。

背景技术

传统的基于细胞的骨组织工程是利用大量的种子细胞种植在支架材料上，通过活性因子等诱导细胞分化成骨。其中，骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stemcells，BMMSCs) 具有自我更新、多向分化、免疫调节的能力，而且比其他干细胞来源更加广泛、获取更加方便，被认为是优良的诱导骨组织再生的种子细胞。但是，直接将骨髓间充质干细胞等种子细胞种植在支架材料上，存在细胞利用率低、附着效率差和细胞在支架材料上分布不均等缺陷。为解决上述问题，细胞膜片技术应运而生。采用细胞膜片技术，细胞分泌的细胞外基质给细胞提供了组织微环境，可以克服上述单纯细胞种植所带来的缺陷，并且利用细胞膜片技术，骨缺损修复效能明显优于多个单细胞修复。

虽然将细胞膜片技术应用与骨组织再生中,已经取得了一定的进展，基于细胞膜片的组织再生工程应用已经得到了广泛的认可，但是，仅仅利用细胞膜片技术，对提升种子细胞的骨修复能力的提升效果仍然有限，尚不能满足现阶段的应用需求，已成为限制骨组织工程技术应用于临床的瓶颈。骨组织工程的研究一直致力于维持种子细胞的成骨稳定性、提升支架材料与种子细胞的生物相容性和加强由种子细胞分化成骨的生物机械性能等。需要对细胞膜片微环境的生物信号及分化机制进行更深入的研究，进而充分了解和掌握相关诱导因素的传递和保持的关键技术点，从而提升细胞膜片技术在骨组织再生中的应用价值。

发明内容

本发明意在提供一种转染miRNA的细胞膜片，以解决使用骨髓间充质干细胞修复颌骨缺损的效果不佳的技术问题。

为达到上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种转染miRNA的细胞膜片，其由骨髓间充质干细胞形成；其细胞中的MicroRNAlet-7a的含量上调。

采用上述技术方案的原理以及有益效果：

MicroRNA(miRNA)是一类长度约为21～23bp的非编码RNA,可通过结合相应靶基因的3'UTR 来调控其转录水平,具有高度的种间保守性,在细胞凋亡、自噬、增殖等生物学进程中起着重要功能。MicroRNA let-7a(mmu-let-7a，MIMAT0000521)是最先被鉴定的miRNA之一，是let-7家族的一员,且在由药物、感染和应激等因素引起的细胞凋亡中具有重要的抗凋亡作用，但在促进细胞成骨方面尚未报导。发明人首次将MicroRNA let-7a转染到由骨髓间充质干细胞形成的细胞膜片中，使得细胞膜片中的MicroRNA let-7a表达量上调。利用转染后的细胞膜片与组织工程材料形成复合骨修复材料，实验证明，MicroRNA let-7a可促进骨髓间充质干细胞成骨，可显著加快模型动物的下颌骨修复进程。