[发明专利]寡核苷酸、病毒载体及其应用和RNAi药物制剂

说明书

本发明涉及医学领域，特别涉及寡核苷酸、病毒载体及其应用和RNAi药物制剂。该寡核苷酸为SEQIDNO：1至SEQIDNO：7所示核酸序列中的一种或两种；或者为与上述寡核苷酸核酸序列的一致性不低于80％的寡核苷酸。本申请发现该RNAi药物可以显著降低突变的COL8A2的表达，可以治疗已经发生的角膜营养不良，也可以预防角膜营养不良的发生。可见，本申请的RNAi药物制剂能有效的治疗和预防COL8A2突变引起的角膜营养不良。

技术领域

本发明涉及医学领域，特别涉及寡核苷酸、病毒载体及其应用和RNAi药物制剂。

背景技术

角膜营养不良(Corneal dystrophy，简称CD)是一组遗传的、通常进展性的眼科疾病，原发于角膜，开始只侵犯角膜的某一层；晚期可波及邻近层次，甚至影响全层角膜；药物治疗无效。影响视力者可进行角膜移植手术治疗。依据解剖学位置分为前部、基质、后部三类。通常后部病症较重，患者比例最多(内皮角膜营养不良)。绝大多数CD都具有各种形状的角膜混浊。CD已有多年研究，但是发生机制仍然不清楚。TGFBI是已报道的较为常见的突变基因，但是TGFBI突变造成的前部CD，多数患者症状不太严重，治疗需求不高，相对而言内皮细胞CD病变程度较为严重。

Fuchs角膜内皮营养不良(福克斯角膜营养不良，Fuchs endothelial cornealdystrophy,FECD)是一种常见的与角膜滴状物的存在有关的遗传性角膜内皮变性疾病，角膜滴状物是角膜内皮层下方的微观胶原积聚。FECD是CD中最为常见的类型，疾病标志包括角膜内皮细胞的丢失，形成Descemet’s膜的赘生物，晚期阶段涉及到角膜的所有细胞层。40岁以后，高达5％的美国成年人表现出角膜滴状物。滴状物的存在是FECD的指征，但通常表现为完全无症状的轻微疾病。晚期(严重)疾病发展于小部分患有滴状物的患者。晚期FECD的特征在于大量的滴状物、内皮细胞损失、角膜水肿、角膜混浊以及由于角膜水肿和混浊导致的视力丧失。角膜水肿、混浊和随后的视力丧失是内皮细胞变性和损失去肿胀的直接后果。最佳治疗方案是角膜移植，但是复发率较高。由于FECD引起的视力丧失是需要全厚度角膜移植(穿透性角膜移植术)的最常见指征，仅在美国每年占超过14,000次手术。对于FECD没有其它治疗可用。尽管角膜移植是一种在很大程度上很成功的治疗，但它也有缺点，它具有侵入性，并且与大约30％的排斥率相关，这与其它实体器官同种异体移植没有什么不同。也可以进行一种仅替换角膜内皮的替代方法(内皮角膜移植术)，但只能由经验丰富的外科医生进行。两种干预均受限于供体材料(源自供体角膜的可移植角膜片或角膜衍生内皮细胞)的缺乏。FECD对于其他手术比如白内障手术也是一种风险，并且对于屈光手术比如激光辅助原位角膜磨镶术(LAISK)是禁忌，因为这些技术导致额外的角膜内皮细胞损失。

FECD分为早发型FECD和年龄相关型FECD，这可能是不同的疾病，因为在早发型FECD中通常不存在滴状物。早发型FECD很少见，并且与Col82A2等基因有关，该基因编码作为内皮基底膜组分的胶原蛋白VIII的α2-亚基。COL8A2是内皮下的大分子成分，角膜内皮细胞的Descemet膜(基底膜)的主要成分，也是血管内皮的组成部分。血管平滑肌细胞迁移和增殖所必需，因此，在维持血管壁完整性和结构，特别是在动脉粥样硬化中具有潜在作用。COL8A2450号氨基酸和455号氨基酸突变会导致患者发病，并且在动物模型中表现出和FECD患者类似的病理变化。